طیف سنجی جذب اتمی چیست و چه کاربردی دارد ؟

تکنیک اسپکتروسکوپی جذب اتمی (Atomic Absorption Spectrometry) یک روش آنالیتیکال آزمایشگاهی برای اندازه گیری غلظت عناصر مختلف می باشد. جذب اتمی یک روش سریع و آسان با حساست بسیار بالا است و قادر به اندازه گیری مقادیر بسیار ناچیز معمولاً تا حد ppm و ppb از یک نمونه است. این تکنیک معمولاً شامل استفاده از یک شعله برای اتمیزه کردن نمونه است، اما روش های دیگری همچون کوره گرافیتی نیز استفاده می شود. شناسایی بر اساس جذب طول موج خاص توسط اتم های نمونه، که مشخصه اتم است، انجام می شود. شدت جذب به طور مستقیم با غلظت نمونه متناسب است.

دستگاه جذب اتمی از تجهیزات آزمایشگاهی است که قادر به آنالیز تعداد زیادی از عناصر فلزی در نمونه مایع می باشد. از دستگاه جذب اتمی در حوزه های مختلفی از جمله آزمایشگاه های صنایع غذایی، دارویی، محیط زیست، آب و فاضلاب، معدن و پزشکی و سلامت استفاده می شود. از کاربرد های آن در حوزه پزشکی میتوان به آنالیز خون اشاره کرد.

بیشتر فلزات سنگین مانند کادمیوم، سرب و جیوه نه تنها برای حیات موجودات زنده ضروری نیستند، بلکه به علت سمیتی که دارند حیات آنها را دچار مخاطره میکنند. مشکلی که عموماً از فلزات سنگین ناشی می­شود آن است که پس از ورود به بدن جانداران از آن خارج نمی­شوند بلکه در بافتهایی مثل چربی یا استخوانها رسوب کرده و انباشته می شوند. این رفتار آنها موجب بروز بیماریها و ناراحتیهای فراوانی در جانداران میشود. بطور خاص در مورد انسان برخی اختلالات عصبی و سرطان ها از نتایج اثرات ورود فلزات سنگین به بدن است. از طرفی خاصیت تجمع پذیری فلزات سنگین در گیاهان و ورود آنها به زنجیره غذایی کنترل خطرات ناشی از آنها را سخت تر می کند. به معنای دیگر آلوده بودن خاک یا آب مورد استفاده در آبیاری محصولات کشاورزی به فلزات سنگین باعث می­شود این عناصر همراه با مواد غذایی مستقیماً وارد بدن انسان شوند یا بصورت غیر مستقیم پس از ورود به بدن چهارپایانی مانند گوسفند و گاو، به بدن انسان وارد شوند.

A-تعدادی از کاربرد های دستگاه جذب اتمی عبارتند از:

1. آنالیز ناخالصی‌های اندک در آلیاژها و معرف‌های مورد استفاده
2. آنالیز تعیین میزان فلزات سنگین در به آب
3. آنالیز تعیین میزان فلزات سنگین در مواد آرایشی و بهاشتی
4. آنالیز تعیین میزان فلزات سنگین در ملزومات پزشکی
5. آنالیز تعیین میزان فلزات سنگین در در مواد غذایی
6. آنالیز تعیین میزان فلزات سنگین در گیاهان
7. آنالیز مستقیم جامداتی چون سنگ معدن‌ و فلزات

در ادامه برخی از کاربرد های مذکور شرح داده خواهند شد .

A1-کاربرد طیف سنجی جذب اتمی در صنایع غذایی:

از دستگاه اتمیک ابزوربشن در موارد متعددی به منظور بررسی کیفیت محصولات غذائی استفاده می شود.برخی از این موارد عبارتند از :

1-اندازه گیری مقدار سلنیم در ماهی

2-بررسی مقدار روی، کبالت و نیکل در سبزیجات

3-آنالیز مس و سرب در شیر خشک کودکان با دستگاه Atomic Absorption

4-تعیین میزان نیکل و وانادیوم در صدف خوراکی

5-آنالیز آرسنیک در برنج و غلات

6-بررسی وجود سرب در گوشت قرمز با دستگاه جذب اتمی

7-تعیین مقدار آرسنیک، جیوه، سرب، کادمیوم و آهن در آب آشامیدنی

-A2کاربرد دستگاه جذب اتمی در آنالیز مواد گیاهی و بررسی مواد بیولوژیکی موجود در آن ها

عناضر غذایی مختلفی برای رشد گیاهان ضروی بوده که این عناصر از خاک و هوای اطراف گیاه تأمین می‌شود. از این رو، گیاهان منبع مهم مواد معدنی هستند. از طرفی، ممکن است برخی عناصر سمی نیز از طریق خاک، آب یا کود وارد بافت گیاهان ‌شوند. بنابراین، بدلایل مختلف و مهمتر از همه سلامت مصرف‌کنندگان این منبع خدادادی، اندازه‌گیری مقدار مواد مغذی و عناصر سمی موجود در گیاهان اهمیت زیادی پیدا می‌کند. با استفاده از دستگاه جذب اتمی شعله می‌توان عناصر سمی و غیرسمی موجود در نمونه‌های گیاهی را اندازه‌گیری نمود.دستگاه طیف‌سنج جذب اتمی یا Atomic Absorption Spectroscopy یکی از تجهیزات آنالیتیکال آزمایشگاهی است که با سرعت و دقت بالا برای اندازه‌گیری و آنالیز عناصر موجود در ترکیبات، حتی با غلظت بسیار ناچیز کاربرد دارد. این دستگاه با استفاده از اتمیزاسیون شعله، حساسیتی تا سطوح ppm برای آنالیز کمی عناصر ارائه می‌دهد. دستگاه جذب اتمی شعله بر این اساس که هر عنصر نور را در طول موج خاصی جذب می‌کند، قادر به تجزیه و تحلیل کیفی عناصر نیز می‌باشد.

 بیشتربدانید:تاثیر فلزات سنگین بر بدن انسان-محدودیت های دستگاه جذب اتمی-روش کار دستگاه جذب اتمی-اجزا دستگاه جذب اتمی

A3- تجزیه و تحلیل میکرو مغذی ها در مواد غذایی

تجزیه و تحلیل میکرو مغذی ها در مواد غذایی یک جنبه مهم در نظارت و کنترل کفیت مواد غذایی است. مواد مغذی می توانند به طور طبیعی در مواد غذایی وجود داشته باشند یا برای تقویت و غنی کردن محصولات غذایی با توجه به نیاز های بازار و در برخی موارد الزامات قانونی، به آنها اضافه شوند. افزایش آگاهی از تأثیر رژیم غذایی بر سلامت انسان تولید کنندگان محصولات غذایی را به تولید غذایی با کیفیت بالاتر و غنی از مواد مغذی ترغیب می کند. از آنجایی که سازمان ها به دنبال جلوگیری از سوء تغذیه سیستماتیک و به طور کلی بهبود عرضه مواد غذایی هستند، نظارت و افزودن الزامی میکرو مغذی ها همچنان در حال رشد است.

شیر یک منبع مهم از مواد مغذی، مخصوصاً برای تغذیه کودکان است. شیر به عنوان یک منبع عالی از کلسیم شناخته شده است و می تواند مقادیر متوسطی Mg، مقادیر کمی Zn و مقدار بسیار کمی Fe و Cu را تأمین کند. به دلیل اهمیت فراوان آن، شیر در چندین شکل مختلف و اغلب به صورت شیر تازه در دسترس است. اما می تواند در فرم های غیر قابل فساد (مانند پودر و تبخیر شده) وجود داشته باشد. بنابراین نیاز به آنالیز چند فرم از شیر برای عناصر مغذی وجود دارد. طیف سنجی جذب اتمی (AAS) می تواند برای تعیین ریز مغذی های موجود در مواد غذایی و مواد بیولوژیکی، مورد استفاده قرار گیرد.

-A4بعضی دیگر از کاربرد های طیف سنجی جذب اتمی عبارتند از :

1-آنالیز عناصر فلزی خون با استفاده از دستگاه طیف سنج جذب اتمی

خون مایعی است که در سراسر بدن گردش می یابد و مواد لازم مورد نیاز ارگان های مختلف بدن را به آنها منتقل می کند. غلظت عناصر موجود در خون تأثیر مستقیمی بر وضعیت سلامت بدن دارد. برخی از فلزات سنگین از موادی هستند که وجودشان در بدن به دلیل سمیّت بالا موجب پدید آمدن بسیاری از مشکلات و بیماری ها می باشد. این فلزات سنگین و سمّی حدود 72 ساعت در جریان خون جابجا می شوند و در انتها از طریق یکی از بافت های بدن از خون خارج می شوند. جذب هر کدام از این فلزات سنگین در ارگان های بدن و تجمع آن موجب بروز بیماری هایی در بدن باشد. تشخیص بموقع این عناصر در خون می تواند عامل موثری در پیشگیری از بروز این بیماری ها باشد. دستگاه طیف سنج جذب اتمی (AAS) تجهیزی است که با دقت بالایی امکان تشخیص کمی و کیفی تعدادی از فلزات سنگین خون را فراهم می آورد. دستگاه جذب اتمی (AA) از تجهیزاتی است که در آنالیز فلزات سنگین از خون بسیار کاربردی می باشد. برای این منظور معمولاً از طیف سنج جذب اتمی کوره گرافیتی (GFAAS) استفاده می شود. این دستگاه قادر است عناصر Trace را با دقت مناسبی اندازه گیری کند. به طور کلی با دستگاه اتمیک ابزوربشن می توان در حدود 25 عنصر را به طور مستقیم از خون اندازه گیری کرد. از مهم ترین این عناصر سرب (Pb) می باشد. در درجات بعدی آلومینیم (AL)، کادمیوم (Cd)، مس (Cu)، منگنز (Mn)، سلنیم (Se)، روی(Zn)، کروم (Cr)، نیکل (Ni)، طلا (Au)، کبالت(Co)، پلاتین (Pt)، پالادیم (Pd)، آهن (Fe)، وانادیم (V)، برلیم (Be)، بیسموت (Bi)، لیتیم (Li)، تالیم (Tl)، آرسنیک (As)، قلع (Sn)، مولیبدن (Mo)، گالیم (Ga)، سیلیسم (Si)، آنتیمون (Sb)، استرانسیم (Sr) و تلوریم (Te) قرار دارند.

2-اندازه گیری آرسنیک در برنج سفید با دستگاه اسپکتروسکوپی اتمیک ابزوربشن

3-بررسی فلزات سنگین ادویه با دستگاه جذب اتمی کوره گرافیتی

4-تجزیه و تحلیل عناصر فلزی روغن خوراکی با تکنیک اسپکتروفتومتر جذب اتمی

5-تعیین فلزات سنگین در نفت کوره با دستگاه آزمایشگاهی Atomic Absorption

6-بررسی وجود سرب Pb در گوشت قرمز با دستگاه جذب اتمی AA

آزمون تشخیص اختصاصیE. Coli

اشریشیا کلی (به اختصار E. coli) یک گیاه مشترک (فلور طبیعی) در روده انسان و حیوانات خونگرم است. بیشتر سویه های E.coli بی ضرر هستند، حتی برخی از آنها با تولید ویتامینK در روده برای میزبان مفید هستند. با این حال، برخی از سویه ها می توانند باعث بیماری های شدید ناشی از غذا شوند.

نشان داده شد که یک تراشه نانوبیوسنسور با استفاده از طیف‌سنجی رامان (SERS) تقویت‌شده سطحی روی لایه‌های نازک نانومجسمه‌سازی شده (nSTFs) نقره، باکتری اشریشیا کلی (E. coli) را تا سطح غلظت یک باکتری شناسایی می‌کند. این حسگر از nSTFهای پلاسمونیک بسیار پیشرفته نقره بر روی یک پلت فرم سیلیکونی برای تقویت باندهای رامان همانطور که با مولکول های 4-آمینوتیوفنول جذب شده بررسی می شود، استفاده می کند.

   برای کسب اطلاعات بیشتر و دریافت خدمات با ما تماس بگیرید.

باکتریوفاژهای T-4 بر روی سطح فوق الذکر تراشه برای جذب خاص باکتری هدفE. coli بی حرکت شدند. برای نشان دادن اینکه هیچ بیحرکتی غیراختصاصی قابل توجهی در سایر باکتری‌ها رخ نمی‌دهد، از سه سویه باکتریایی مختلف، کروموباکتریوم ویولاسئوم، پاراکوکوس دنیتریفیکانس و سودوموناس آئروژینوزا استفاده شد. علاوه بر این، آزمایش‌هایی که بر روی یک سویه اضافی ازE. coli برای پرداختن به ویژگی و قابلیت استفاده مجدد حسگر انجام شد، نشان داد که حسگر برای سویه‌های مختلفE. coli عمل می‌کند و قابل استفاده مجدد است. میکروسکوپ زمان حل و فصل کنتراست فاز تراشه باکتریوفاژE. coli-T4 برای مطالعه تعامل آن با باکتری در طول زمان انجام شد. نتایج نشان داد که حسگر حاضر تشخیص سریع، دقیق و پایدارE. coli را با غلظت‌های بسیار کم باکتری تا سطح یک باکتری در حجم 10 میکرولیتر از نمونه انجام می‌دهد.

سابقه و هدف: E. coli O157:H7 یکی از پاتوژن های روده ای است که می تواند باعث ایجاد ضایعات شدید در دستگاه گوارش شود. این باکتری ها می توانند سموم تولید کنند و عامل اصلی عفونت های بیمارستانی هستند. تشخیص آنها معمولاً با کشت روی سوربیتول مک کانکی آگار انجام می شود که آزمایشی زمان بر است. هدف از این مطالعه ایجاد روشی سریع و در عین حال دقیق برای شناسایی این باکتری با استفاده از روش مبتنی برPCR بود.

مواد و روش‌ها: ژن‌های rfbE وstx2b جهت شناسایی کردن  سویه اختصاصی E. coli O157:H7 انتخاب شده اند. سپس با طراحی پرایمرهای اختصاصی، تکثیر باPCR انجام شد. آگارSorbitol-MacConkey برای بررسی توانایی رشد کلنی های منتخب در طیPCR استفاده شد.

یافته‌ها: با توجه به ظاهر پیوندهای متعلق به ژن‌های rfbE وstx2B روی ژل آگارز، توانایی پرایمرهای طراحی‌شده برای تشخیص ژن در نمونه‌هایE.coli O157:H7 تأیید شد. برای ارزیابی قدرت رشد کلنی های انتخاب شده در طیPCR از محیط سوربیتول-مک کانکی آگار استفاده شد.

اشریشیا کلی: خواص و شناسایی

اشریشیا کلی (به اختصار E. coli) یک گیاه مشترک (فلور طبیعی) در روده انسان و حیوانات خونگرم است. بیشتر سویه های E.coli بی ضرر هستند، حتی برخی از آنها با تولید ویتامینK در روده برای میزبان مفید هستند. با این حال، برخی از سویه ها می توانند باعث بیماری های شدید ناشی از غذا شوند.

سویه های مختلف اشریشیا کلی و بیماری های ناشی از آنها

برخی از سویه های E. coli با به دست آوردن فاکتورهای حدت از طریق پلاسمیدها، ترانسپوزون ها، باکتریوفاژها و یا جزایر بیماری زایی به E. coli بیماریزا تبدیل شده اند. باکتریE. coli روده ای بیماری زا ممکن است بر اساس مکانیسم ایجاد اسهال به چهار سویه طبقه بندی شود. آن ها هستند؛ انتروهموراژیک (EHEC)، یا وروتوکسیژنیک (VTEC)، انتروتوکسیژنیک (ETEC)، انتروپاتوژنیک (EPEC) و انتروتهاجمی (EIEC) یا انتروآگرگاتیو (EAEC).

سویه های مولد اگزوتوکسین از اشریشیا کلی می توانند اسهال آبکی (غیر خونی) و اسهال خونی بسته به اگزوتوکسینی که تولید می کنند ایجاد کنند. به عنوان مثال، سویه های انتروتوکسیژنیک اشریشیا کلی یکی از علل شایع اسهال آبکی (همچنین به عنوان اسهال مسافرتی شناخته می شود) در کشورهای در حال توسعه است.

بیماری های ناشی ازE.coli

عفونت های دستگاه ادراری (UTI): E.coli شایع ترین علت عفونت های مجاری ادراری هم در جامعه و هم عفونت های بیمارستانی است.E.coli باعث بیش از 75 درصد مواردUTI می شود.

E.coli دومین عامل مهم سپسیس گرم منفی میله است

عفونت پری ناتال با E.coli (قرار گرفتن نوزاد با E.coli کلونیزه شده در کانال زایمان مادر در هنگام زایمان طبیعی) علت اصلی مننژیت نوزادی است.

اشرشیاکلی انتروتوکسیژنیک (ETEC) مسئول اسهال مسافرتی (اسهال آبکی) است.

سویه های انتروهموراژیک E.coli (یعنی شیگا توکسین STx تولید کنندهE. coli) باعث اسهال خونی و سندرم اورمیک همولیتیک (HUS) می شود.

ویژگی هایE.coli

رنگ آمیزی گرم: اشریشیا کلی یک میله کوتاه یا باسیل مستقیم گرم منفی است

سلول های اشرشیاکلی میله های کوچکی به طول 1.0-2.0 میکرومتر با شعاع حدود 0.5 میکرومتر هستند.

1. coli شایع ترین بی هوازی اختیاری در روده بزرگ و مدفوع می باشد.

زمان تولید شدن به عبارتی دوبرابر شدن اشریشیا کلی 20 دقیقه است.

E.coli تخمیر کننده لاکتوز است که کلنی های صورتی درMacConkey آگار ایجاد می کند (این ویژگیE.coli را از سالمونلا و شیگلا متمایز می کند - دو شایع ترین پاتوژن روده)

خاصیت آنتی ژنی: بیشتر از 1000 نوع آنتی ژنی اشرشیاکلی وجود دارد.

آ. آنتی ژن های دیواره سلولی O (بیش از 150 نوع)

ب آنتی ژن H- تاژک (بیش از 50 نوع)

ج آنتی ژن کپسولی (بیش از 90 نوع)

عوامل بیماریزاE.coli

پیلی: به چسبیدن ارگانیسم ها به سلول های ژژنوم و ایلئوم در صورت عفونت روده کمک می کند. اپیتلیوم دستگاه ادراری در صورت عفونت دستگاه ادراری.

کپسول: با فاگوسیتوز تداخل دارد و نقش اصلی را در عفونت های سیستمیک ایفا می کند.

اندوتوکسین (لیپوپلی ساکارید): مسئول چندین ویژگی سپسیس گرم منفی مانند تب، افت فشار خون و انعقاد داخل عروقی منتشر (DIC) است.

اگزوتوکسین ها به عنوان مثال انتروتوکسین روی سلول های ژژنوم و ایلئوم اثر می گذارد و باعث اسهال می شود. سایر اگزوتوکسین ها وروتوکسین، سم شیگا مانند و غیره هستند.

مقالات بیشتر:

بایو بردن

تشخیص اختصاصی میکروبها

تست آلودگی مایکوپلاسمایی

شیر و فرآورده های آن

ویژگی های تشخیصیE.coli

طرحی برای شناسایی سریع E. coli.

مورفولوژی کلنی: E.coli لاکتوز را تخمیر می کند و کلنی های صورتی درMacConkey Agar تولید می کند. کلنی های معمولی اشریشیا کلی در آگارMacConkey صورتی و براق ظاهر می شوند و پس از انکوباسیون یک شبه قطری بین 0.5 تا 1 میلی متر دارند. ظاهر کلنی از خاکستری تا سفید، شفاف تا مات، و به صورت محدب تا صاف روی صفحات خون آگار متفاوت است. با این حال، برخی ازE.coli متعلق به گروهAlkaligens-Dispar (A-D) ممکن است تخمیر غیر لاکتوز در Mac-Conkey آگار باشد. (E.coli O157: H7 سوربیتول را تخمیر نمی کند، که معیار مهمی است که آن را از سایر سویه هایE. coli متمایز می کند)

در آگار EMB، E. coli یک درخشش سبز مشخص ایجاد می کند.

آزمایشات بیوشیمیایی

ایندول مثبت: ایندول را از تریپتوفان تولید می کند

متحرک است

لیزین را دکربوکسیله می کند

از استات به عنوان تنها منبع کربن استفاده می کند

تست حساسیت ضد میکروبی

آزمایش حساسیت را با روش انتشار دیسک با استفاده از روش های استاندارد شرح داده شده در دستورالعمل ها انجام دهید. برای تشخیص E.coli مولدESBL، ایزوله غربال شده باید به چند دارو مقاوم باشد و حداقل به یکی از سفالوسپورین های نسل سوم مقاومت نشان دهد.

بتالاکتامازهای با طیف گسترده (ESBL) گروهی از بتالاکتامازها هستند که به سرعت در حال تکامل هستند که می توانند سفالوسپورین های نسل سوم و آزترئونام را هیدرولیز کنند اما توسط اسید کلاوولانیک مهار می شوند. افزایش مقاومت به سفالوسپورین های نسل سوم در میان باکتری E. coli عمدتاً به دلیل تولیدESBL است. این آنزیم‌های واسطه پلاسمید عمدتاً از طریق جهش‌ های نقطه ‌ای کلاسیکTEM-1 وSHV-1 β-لاکتاماز تکامل یافته‌ اند.

تست غربالگری برایE.coli تولید کنندهESBL

طبق دستورالعمل‌های CLSI، جدایه‌ هایی که اندازه ناحیه بازداری ≤ 22 میلی‌متر با سفتازیدیم (30 میکروگرم)، ≤ 25 میلی‌متر با سفتریاکسون (30 میکروگرم)، و ≤ 27 میلی‌متر با سفوتاکسیم (30 میکروگرم) را نشان می‌ دهند ، به‌عنوان تولیدک نندگان ESBL شناسایی م ی‌شوند. در لیست نهایی تایید تولیدESBL قرار گرفت.

تست های تاییدی برایESBL

طبق دستورالعمل‌ های CLSI، دو روش فنوتیپی می ‌توانند تولیدکنندگان ESBL را تأیید کنند:

روش دیسک ترکیبی

این آزمایش مستلزم استفاده از دیسک آنتی بیوتیک سفالوسپورین نسل سوم به تنهایی و در ترکیب با اسید کلاوولانیک است. در این مطالعه، یک دیسک سفتازیدیم (30 میکروگرم) / سفوتاکسیم (30 میکروگرم) / سفپودوکسیم (30 میکروگرم) به تنهایی و یک دیسک از اسید کلاوولانیک مربوطه یا سفتازیدیم - اسید کلاوولانیک (30 میکروگرم / 10 میکروگرم) / سفوتاکسیم - اسید کلاوولانیک (30/ 10 میکروگرم/سفپودوکسیم – اسید کلاوولانیک (30/10 میکروگرم) استفاده می ‌شود. هر دو دیسک با فاصله حداقل 25 میلی متر از هم ، مرکز به مرکز ، روی کشت چمن ایزوله آزمایشی روی صفحه مولر هینتون آگار (MHA) قرار می گیرند و یک شب در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه می شوند. تفاوت در قطر منطقه با و بدون اسید کلاوولانیک اندازه گیری می شود.

تفسیر: افزایش ≥ 5 میلی متری در قطر ناحیه مهار در اطراف دیسک ترکیبی سفالوسپورین کلاوولانیک اسید در مقابل قطر ناحیه مهار در اطراف دیسک سفالوسپورین به تنهایی تولید ESBL را تایید می کند.

روش سینرژی دو دیسک

این آزمایش به دو دیسک از یک سفالوسپورین نسل سوم ، سفوتاکسیم ، سفتازیدیم یا سفپودوکسیم نیاز دارد. یک دیسک سفتازیدیم 30 میکروگرم و یک دیسک آموکسی سیلین + کلاوولانیک اسید 20 + 10 میکروگرم در فاصله 25 تا 30 میلی متری از هم ، مرکز به مرکز روی یک کشت چمن ایزوله آزمایش بر روی صفحه مولر هینتون آگار (MHA) قرار داده می شود.

تفسیر: تولید ESBL زمانی استنباط می شود که کلاوولانات ناحیه مهار را در اطراف دیسک سفتازیدیم به شکل برگ شبدری گسترش دهد.

مقالات بیشتر:

صحه گذاری بایوبردن

صحه گذاری استریلیتی

تست میکروبی اتاق تمیز

آزمون ماسک های پزشکی

اشرشیاکلی اروپاتوژنیک

سویه های اشرشیاکلی اروپاتوژنیک (UPEC) باعث 70 تا 90 درصد عفونت های مجاری ادراری اکتسابی از جامعه (UTIs) در حدود 150 میلیون نفر در سال و حدود 40 درصد از عفونت های بیمارستانی می شوند. ژن های حدت مختلف با عفونت های دستگاه ادراری ناشی از اشریشیا کلی مرتبط هستند.

اشرشیاکلی اروپاتوژن (UPEC)

سویه های اروپاتوژنیک اشرشیاکلی ، خواص ، محصولات یا ساختارهای باکتریایی متمایز (عوامل بیماری زای) را بیان می کنند که به آنها کمک می کند بر دفاع میزبان غلبه کنند و به مجاری ادراری کلونیزه یا حمله کنند.

در مقایسه با E.coli کامنسال،E.coli هایuropathogenic بهتر با مجرای ادرار سازگار هستند و نسبت بیشتری ازUTI ایجاد می کنند. هر چه یک سویه فاکتورهای حدت بیشتری را بیان کند، عفونت شدیدتری ایجاد می کند.

عوامل بیماری زایی که در پاتوژنز عفونت دستگاه ادراری (UTI) اهمیت دارند عبارتند از:

چسبنده ها (P fimbriae، برخی دیگر از چسبنده های مقاوم به مانوز، و fimbriae نوع 1): با اتصال به ساختارهای میزبان، از جاروب شدن توسط جریان طبیعی ادرار و دفع آن جلوگیری می کند. دلبستگی اولین گام ضروری در استعمار و سابقه ای برای عفونت تهاجمی در بسیاری از موقعیت ها است.

آنتی ژن K (پلی ساکارید کپسولی): آنها سلول را می پوشانند و در تشخیص آنتی ژن 0 اختلال ایجاد می کنند و از آن در برابر مکانیسم های دفاعی میزبان محافظت می کنند. کپسول دارای فعالیت ضد فاگوسیتیک و ضد مکمل است. میزان اختلال فاگوسیتوز با مقدار پلی ساکاریدها متناسب است.

مقاومت در برابر کشتن سرم: پلی ساکاریدهای کپسولی اسیدی و کپسول Kl با محافظت از باکتری ها در برابر فاگوسیتوز و احتمالاً از کشتن سرم، تا حدی با مسدود کردن فعال شدن مسیر مکمل جایگزین، به حدت کمک می کنند.

همولیزین: سم پروتئین سیتولیتیک که گلبول های قرمز تمام پستانداران را لیز می کند

تعیین مقدار فلزات سنگینسرب

فلزات سنگین

فلزات سنگین اجزای طبیعی پوسته زمین هستند. آنها را نمی توان از بین برد. مقداری از آن ها از طریق غذا ها ، آب های آشامیدنی و هوا وارد بدن انسان ها می شوند. به عنوان یک عناصر کمیاب ، بعضی از فلزات سنگین (مثل مس، سلنیوم، روی) جهت حفظ شدن متابولیسم بدن انسان ها ضروری می باشد. به عنوان مثال، مسمومیت با فلزات سنگین می تواند ناشی از آلودگی آب آشامیدنی (مانند لوله های سرب)، غلظت بالای هوای محیط در نزدیکی منابع انتشار یا دریافت از طریق زنجیره غذایی باشد. فلزات سنگین خطرناک می باشند به این دلیل که تمایل به تجمع زیستی دارند.

فلزات سنگین می توانند از طریق پسماندهای صنعتی و مصرفی، یا حتی از باران اسیدی که خاک را تجزیه می کند و فلزات سنگین را در نهرها، دریاچه ها، رودخانه ها و آب های زیرزمینی رها می کند، وارد منبع آب شوند. فلزات سنگین مانند آرسنیک، کادمیوم و سرب در اکثر غذاها، چه معمولی و چه ارگانیک، معمولاً در نتیجه آلودگی محیطی وجود دارند. از آنجایی که فلزات سنگین حتی در سطوح پایین نیز تهدید قابل توجهی هستند، سازمان غذا و دارو (FDA) کاهش قرار گرفتن در معرض تجمعی را در اولویت قرار داده است

   برای کسب اطلاعات بیشتر و دریافت خدمات با ما تماس بگیرید.

اثرات سرب بر محیط زیست

اثرات مختلفی در طیف وسیعی از دوزها رخ می‌دهد و جنین و نوزاد در حال رشد نسبت به بزرگسالان حساس‌تر هستند. سطوح بالای قرار گرفتن در معرض ممکن است منجر به اثرات بیوشیمیایی سمی در انسان شود که به نوبه خود باعث ایجاد مشکلاتی در سنتز هموگلوبین، اثراتی بر کلیه ها، دستگاه گوارش، مفاصل و دستگاه تناسلی و آسیب حاد یا مزمن به سیستم عصبی می شود.

مسمومیت با سرب، که آنقدر شدید است که باعث بیماری آشکار می شود، در حال حاضر واقعاً بسیار نادر است. با این حال، در غلظت‌های متوسط، شواهد قانع‌کننده‌ای وجود دارد که نشان می‌دهد سرب می‌تواند اثرات کوچک، ظریف و تحت بالینی، به‌ویژه بر تحولات عصبی روان‌شناختی در کودکان داشته باشد. برخی از مطالعات نشان می دهد که ممکن است برای افزایش سطح سرب خون از 10 به 20 میکروگرم در دسی لیتر در کودکان خردسال تا 2 امتیاز IQ کاهش یابد.

میانگین مصرف روزانه سرب برای بزرگسالان در بعضی از کشور ها 1.6 میکروگرم از هوا، 20 میکروگرم از آب آشامیدنی و 28 میکروگرم از غذا برآورد شده است. اگرچه اکثر مردم بخش عمده ای از سرب مصرفی خود را از غذا دریافت می کنند، اما در جمعیت های خاص، منابع دیگری مانند آب در مناطق دارای لوله های سرب و آب حلال، هوا در نزدیکی نقطه انتشار، خاک، گرد و غبار، تکه های رنگ در قدیم ممکن است مهمتر باشند. خانه ها یا زمین های آلوده سرب موجود در هوا از طریق رسوب گرد و غبار و باران حاوی فلز، روی محصولات و خاک به سطح سرب در غذا کمک می کند. با این حال، برای اکثر مردم ، قرار گرفتن در معرض رژیم غذایی با سرب بسیار کمتر از میزان مصرف موقت قابل تحمل هفتگی توصیه شده توسط سازمان غذا و کشاورزی سازمان ملل متحد و سازمان بهداشت جهانی است.

سرب به چه شکلی منتشر می شود؟

سرب در محیط هم از منابع طبیعی و هم از منابع انسانی ناشی می شود. قرار گرفتن در معرض می تواند از طریق آب آشامیدنی، غذا، هوا، خاک و گرد و غبار رنگ های قدیمی حاوی سرب رخ دهد. در جمعیت بزرگسال غیرسیگاری، مسیر اصلی مواجهه از طریق غذا و آب است. غذا، هوا، آب و گرد و غبار/خاک مسیرهای بالقوه قرار گرفتن در معرض برای نوزادان و کودکان خردسال هستند. برای نوزادان تا 4 یا 5 ماهگی، هوا، شیر خشک و آب منابع مهمی هستند.

سرب در بین فلزات غیرآهنی قابل بازیافت می باشد خواص فیزیکی و شیمیایی آن در صنایع تولیدی، ساختمانی و شیمیایی کاربرد دارد. به راحتی شکل می گیرد و چکش خوار و انعطاف پذیر است. هشت دسته عمده استفاده وجود دارد: باتری ها، افزودنی های بنزین (دیگر در اتحادیه اروپا مجاز نیستند)، محصولات نورد شده و اکسترود شده، آلیاژها، رنگدانه ها و ترکیبات، پوشش کابل، گلوله و مهمات.

طیف وسیعی از عناصر فلزی فلزات سنگین در نظر گرفته می شوند. این عناصر می‌توانند در غلظت‌های بالا مضر باشند و باید با آزمایش‌های متخصص کمیت‌سازی شوند. کارشناسان آزمایشگاهی ما فلزات سنگین را با استفاده از پلاسمای جفت شده القایی (ICP)، همراه با طیف‌سنجی انتشار نوری (OES) یا طیف‌سنجی جرمی (MS) آزمایش می‌کنند.

آزمایشات عنصر برای بسیاری از فلزات سنگین، از جمله آرسنیک، سرب، اورانیوم و جیوه، در انواع ماتریس های مختلف محیطی. محدودیت های گزارش دهی برای فلزات هدف معمولاً بر حسب ppb (قسمت در میلیارد) اندازه گیری می شود، اما می تواند به اندازه ppt (قسمت در تریلیون) باشد. آزمایشگاه ما می تواند ظروف نمونه، فیلترها، سرنگ ها و مواد نگهدارنده را برای کمک به نیازهای آزمایشی شما ارائه دهد.

آزمایشگاه فلزات

آزمایشگاه فلزات با استفاده از طیف‌سنجی پلاسمای جفت القایی (ICP وICP/MS) و ابزارهای جذب اتمی تزریق جریان، می‌تواند غلظت فلزات را تا چند قسمت در میلیارد اندازه‌گیری کند. فلزات سنگین در یک ماده غذایی غیرقابل تشخیص هستند. با این حال، اگر آزمایشگاه از یک روش تحلیلی به اندازه کافی حساس استفاده نکرده باشد، یا اگر رویه های آنها دقت کافی نداشته باشد، نتیجه غیرقابل تشخیص ممکن است ناخواسته یک مشکل بالقوه را پنهان کند. زمانی که خریداران، سازمان غذا و دارو یا مردم با استفاده از آزمایشگاه دیگری آزمایش‌هایی را انجام می‌دهند و مواد موجود در محصول یک شرکت را پیدا می‌کنند، می‌تواند شرایط دشواری ایجاد کند.

تجزیه و تحلیل فلزات سنگین و سایر عناصر در محصولات غذایی

غذای سالم دغدغه اصلی همه است. شیوع اخیر آلاینده ها و غذاهای تقلبی، منجر به افزایش آگاهی عمومی و مقررات دولتی شده است. اگرچه موارد خبرساز آلاینده‌ها را در سطوح بالا برجسته می‌کنند، حتی سطوح پایین غلظت می‌تواند خطرناک باشد مانند آرسنیک (As) در غذای کودک یا سلنیوم (Se) در مکمل‌های جامد و مایع.

هیچ تولیدکننده مواد غذایی نمی‌خواهد فلزات سنگین یا سایر عناصر خطرناک در محصولاتشان قرار بگیرند. با این حال، آنها می توانند از طریق مواد تقلبی عمدی یا تصادفی، مانند سرب (Pb) و کروم (Cr) در رنگ ها یا آرسنیک (As) و برم (Br) از آفت کش ها وارد تولید شوند. مهم است که اطمینان حاصل شود که این آلاینده ها در هیچ مرحله ای از تولید مواد غذایی وجود ندارند.

مقالات بیشتر:

بایو بردن

مواد غذایی

گیاهان دارویی

ادویه جات

آزمون تعیین بار میکروبی

فلزات سنگین در آزمایش خاک

بسته به روش مورد نیاز، نمونه‌های خاک معمولاً با استفاده از اسیدهایی مانند HNO3 یاAqua Regia استخراج می‌شوند و در یک سیستم محصور در یک بلوک داغ یا مایکروویو هضم می‌شوند. سایر استخراج ها را می توان برای فلزات موجود مانندDTPA یا آب استفاده کرد. پس از استخراج فلزات، نمونه هضم شده فیلتر شده و برای تجزیه و تحلیل توسطICP آماده می شود.

هنگام آزمایش فلزات سنگین در نمونه های خاک، حداکثر زمان نگهداری وجود ندارد. با این حال، عملا، آزمایشگاه به طور معمول نمونه را برای 30-60 روز نگه می دارد. در صورت رعایت بهترین روش، نمونه ها باید در یک ظرف دربسته قرار داده شوند، خنک و دور از نور مستقیم خورشید نگهداری شوند.

فلزات سنگین در آزمایش آب

هنگام گرفتن نمونه آب در مزرعه، آنها را فیلتر می کنند (برای تجزیه و تحلیل فلزات محلول) و با اسید حفظ می شوند. آب باید با اسید نیتریک حفظ شود تا PH به کمتر از 2 برسد. این امر باعث می‌شود که فلزات به صورت نمک محلول باقی بمانند و از تبدیل شدن به نمک‌های نامحلول که از محلول خارج می‌شوند و می‌توانند نتایج را به طور مصنوعی پایین بیاورند، جلوگیری می‌کند.

برای آزمایش فلزات محلول، نمونه ها باید در مزرعه از طریق یک فیلتر 0.45 میکرومتر فیلتر شده و سپس با اسید نیتریک که توسط آزمایشگاه ارائه می شود، نگهداری شوند. پس از حفظ، زمان نگهداری نمونه را می توان تا 6 ماه افزایش داد (اگرچه آزمایشگاه تمایل دارد نمونه ها را فقط 1-2 ماه در خانه نگه دارد).

برای آزمایش کل فلزات در آب، به سادگی اسید نیتریک را مستقیماً به آب نمونه اضافه کنید. اگر رسوبات در نمونه وجود داشته باشد، فلزات از جامدات شسته می شوند و در نتیجه غلظت فلزات در آب بیشتر از زمانی است که برای فلزات محلول آزمایش می شود. این آزمایشی است که معمولاً روی آب‌های سطحی انجام می‌شود و یک دید کلی از تحرک فلزات در محیط از طریق آب ارائه می‌دهد.

آزمایش فلزات سنگین با پلاسمای جفت شده القایی (ICP)

آزمایش پلاسمای جفت شده القایی تکنیکی است که می تواند غلظت ردیابی عناصر اصلی را تعیین کند و می تواند اکثر عناصر جدول تناوبی را تشخیص دهد.

محلولی حاوی فلزات محلول از طریق نبولایزر به داخل محفظه اسپری ابزار ICP آسپیره می شود و در آنجا با گاز آرگون مخلوط می شود تا یک آئروسل ریز تشکیل شود. این آئروسل سپس وارد پلاسما می شود.

مجموعه‌ای از محلول‌ها با غلظت شناخته شده برای ارائه یک منحنی کالیبراسیون برای هر عنصر تجزیه و تحلیل می‌شوند. نرم افزار ابزار، نمونه ها را با منحنی های کالیبراسیون مقایسه می کند و غلظت هر عنصر را محاسبه می کند.

تحریک زایی

تحریک زایی؛هر وسیله پزشکی موجود در بازار باید از نظر پتانسیل ایجاد سوزش، از زانوبند گرفته تا ضربان ساز مصنوعی قلبی، صرف نظر از اینکه در معرض کوتاه مدت یا طولانی مدت با کاربر/بیمار قرار داشته باشد، ارزیابی شود. این الزامی است که در سازمان بین‌المللی استاندارد (ISO) 10993-1: 2018: ارزیابی بیولوژیکی دستگاه‌های پزشکی - قسمت 1: ارزیابی و آزمایش در فرآیند مدیریت ریسک ذکر شده است. این استاندارد از سازندگان می‌خواهد که ایمنی یک دستگاه پزشکی را ارزیابی کنند تا اطمینان حاصل کنند که با استفاده از مواد و فرآیندهایی تولید می‌شود که باعث واکنش نامطلوب (به عنوان مثال، تحریک، آلرژی، تب، کاهش وزن غیرعمدی) نمی‌شود. تنظیمات.

 برای کسب اطلاعات بیشتر و دریافت خدمات با ما تماس بگیرید.

در حال حاضر، الزامات ارزیابی تحریک برای دستگاه های پزشکی در دو استاندارد مختلف سری ISO 10993 پوشش داده شده است: ISO 10993-10:2010 و ISO 10993-23:2021 آزمایش های تازه منتشر شده برای تحریک. این وضعیت این سؤال را ایجاد می کند: کدام استاندارد باید در اسناد داخلی ارجاع داده شود و در آزمایشات آزمایشگاهی استفاده شود؟ و کدام استاندارد توسط مراجع نظارتی پذیرفته شده است؟ با این حال، سؤالات نهایی این است که سازندگان دستگاه اکنون از کدام دستورالعمل استاندارد یا رویکرد آزمایشی استفاده کنند؟ و این موضوع برای ارسال های نظارتی در این فاصله چگونه انجام می شود؟

تحریک یکی از سه آزمایش رایج مورد نیاز برای اطمینان از ایمنی وسایل پزشکی است. آزمایش تحریک در ارزیابی پتانسیل یک دستگاه برای ایجاد واکنش تحریک فوری پس از قرار گرفتن در معرض بدن ضروری است. روش‌های متعددی مانند سنجش‌های in vivo و in vitro در دسترس هستند. روش های آزمایشگاهی شبکه تست تجهیزات پزشکی Eurofins بر اساس مسیر خاص قرار گرفتن در معرض بدن از جمله پوست، مخاط یا چشم انتخاب و انجام می شود.

تست دستگاه پزشکی Eurofins را انتخاب کنید تا به شما کمک کند:

الزامات نظارتی برای تحریک را درک کنید

روش تست مناسب را برای محصول/مواد خود مطابق با ISO 10993-23/USP <88> یا ترکیبی از هر دو انتخاب کنید.

دستگاهی را که باعث تحریک پوست، مخاط یا چشم می شود، شناسایی کنید.

نظارتی:

ISO 10993-23:2021 ارزیابی بیولوژیکی تجهیزات پزشکی قسمت 23: "تست برای تحریک" الزامات کلی برای ارزیابی پتانسیل تحریک یک دستگاه پزشکی را فراهم می کند.

ISO 10993-1 جدول A.1 - "نقاط پایانی که باید در ارزیابی خطر بیولوژیکی مورد توجه قرار گیرند"

تست در دسترس است

تحریک پوستی (آزمایش های درون تنی و آزمایشگاهی)

واکنش داخل جلدی

تحریک چشم (آزمون های in vivo و in vitro)

تحریک بینی

تحریک دهان

تحریک واژن

تحریک آلت تناسلی

تحریک رکتوم

آزمایش تحریک دستگاه های پزشکی یک صنعت بسیار تنظیم شده است (در مورد تمیز کردن و اعتبار سنجی دستگاه های پزشکی بیشتر بخوانید) با الزاماتی برای تمیز کردن، استریل کردن، پردازش مجدد و آزمایش تحریک. مشابه با زیست سازگاری، آزمایش تحریک تعیین می کند که آیا ماده یا خود دستگاه باعث تحریک می شود یا خیر.

آزمایش تحریک دستگاه پزشکی برای اندازه گیری واکنشی که ممکن است یک بار قرار گرفتن در معرض یا قرار گرفتن مکرر در معرض دستگاه و مواد آن بر روی پوست یا داخل بدن داشته باشد، انجام می شود. تحریک با التهاب، قرمزی، تورم، گرما و/یا درد مشخص می شود.

آزمایش تحریک توسط استانداردهای بین المللی و مقررات FDA الزامی است. آزمایش‌هایی برای تحریک روی پوست و غشاهای مخاطی (مانند اطراف چشم و بینی) انجام می‌شود و میزان قرار گرفتن در معرض آن را قبل از تحریک (در صورت وجود) تعیین می‌کند.

تحریک می تواند از مواد شیمیایی موجود در دستگاه و مواد آن رخ دهد، برخی باعث واکنش های فوری و برخی دیگر باعث واکنش های تاخیری می شوند. ISO 10993-10 یک رویکرد چهار لایه برای درک و تعیین پتانسیل دستگاه برای ایجاد تحریک ارائه می دهد. ابتدا، سازندگان باید تعیین کنند که آیا گزارش هایی مبنی بر تحریک ناشی از ماده شیمیایی یا ماده مورد نظر وجود داشته است یا خیر. دوم، آزمایش‌های آزمایشگاهی معتبری را پیدا کنید که مواد تحریک‌کننده را شناسایی می‌کنند. اگر در مرحله یک یا دو نتوان یک ماده را رد کرد، مرحله سوم انجام آزمایشin vivo (اعم از داخل جلدی، پوست اولیه یا تحریک چشمی) روی ماده شیمیایی یا ماده برای تعیین پتانسیل تحریک است. در نهایت، ممکن است نیاز به انجام یک مطالعه بالینی غیرتهاجمی بر روی افراد باشد.

آزمایش تحریک دستگاه های پزشکی یک صنعت بسیار تنظیم شده است (در مورد تمیز کردن و اعتبار سنجی دستگاه های پزشکی بیشتر بخوانید) با الزاماتی برای تمیز کردن، استریل کردن، پردازش مجدد و آزمایش تحریک. مشابه با زیست سازگاری، آزمایش تحریک تعیین می کند که آیا ماده یا خود دستگاه باعث تحریک می شود یا خیر.

آزمایش تحریک دستگاه پزشکی برای اندازه گیری واکنشی که ممکن است یک بار قرار گرفتن در معرض یا قرار گرفتن مکرر در معرض دستگاه و مواد آن بر روی پوست یا داخل بدن داشته باشد، انجام می شود. تحریک با التهاب، قرمزی، تورم، گرما و/یا درد مشخص می شود.

آزمایش تحریک توسط استانداردهای بین المللی و مقررات FDA الزامی است. آزمایش‌هایی برای تحریک روی پوست و غشاهای مخاطی (مانند اطراف چشم و بینی) انجام می‌شود و میزان قرار گرفتن در معرض آن را قبل از تحریک (در صورت وجود) تعیین می‌کند.

تحریک می تواند از مواد شیمیایی موجود در دستگاه و مواد آن رخ دهد، برخی باعث واکنش های فوری و برخی دیگر باعث واکنش های تاخیری می شوند. ISO 10993-10 یک رویکرد چهار لایه برای درک و تعیین پتانسیل دستگاه برای ایجاد تحریک ارائه می دهد. ابتدا، سازندگان باید تعیین کنند که آیا گزارش هایی مبنی بر تحریک ناشی از ماده شیمیایی یا ماده مورد نظر وجود داشته است یا خیر. دوم، آزمایش‌های آزمایشگاهی معتبری را پیدا کنید که مواد تحریک‌کننده را شناسایی می‌کنند. اگر در مرحله یک یا دو نتوان یک ماده را رد کرد، مرحله سوم انجام آزمایشin vivo (اعم از داخل جلدی، پوست اولیه یا تحریک چشمی) روی ماده شیمیایی یا ماده برای تعیین پتانسیل تحریک است. در نهایت، ممکن است نیاز به انجام یک مطالعه بالینی غیرتهاجمی بر روی افراد باشد.

چرا تحریک را ارزیابی کنیم؟

اول، مهم است که بدانیم چرا تحریک ارزیابی می شود و چه چیزی باعث تغییر در استاندارد شده است. تحریک در ISO 10993-23 به عنوان "یک پاسخ التهابی موضعی، غیر اختصاصی به استفاده منفرد، مکرر یا مداوم از یک ماده/ماده" تعریف شده است. این استاندارد همچنین تصریح می کند که "این یک واکنش برگشت پذیر است و عمدتاً با اریتم موضعی (قرمزی) و ادم (تورم) پوست مشخص می شود." بسیاری از افراد معمولاً پس از استفاده از یک شوینده خاص، با خارش و احتمالاً بثورات، واکنش تحریکی را تجربه کرده‌اند. سپس، هنگامی که دیگر از مواد شوینده استفاده نشد، بثورات ناپدید شدند. واکنش مشابهی را می توان با وسایل پزشکی مانند بانداژ نیز مشاهده کرد.

اگرچه تحریک معمولاً به خودی خود یک پاسخ تهدید کننده زندگی نیست، اگر در مدت طولانی بدون مراقبت رها شود، می‌تواند منجر به مشکلات سلامتی بیشتر شود. برای پیش‌بینی پاسخ تحریکی به دستگاه‌های پزشکی، رایج‌ترین آزمایش تحریکی که انجام می‌شود، تست واکنش‌پذیری داخل جلدی است (و بوده است). این آزمایش با تزریق عصاره یک دستگاه پزشکی به بافت زیر جلدی خرگوش و مشاهده پاسخ بافت موضعی برای قرمزی و تورم طی چند روز انجام می شود. در طول آزمایش، امتیاز نهایی از 0 تا 4 برای هر محل تزریق بر اساس سطح واکنش مشخص شده (یعنی قرمزی یا تورم) داده می شود که نتیجه گیری در مورد پتانسیل تحریک دستگاه ارائه می دهد.

نیاز به جایگزین

با توجه به اینکه اکثر دستگاه‌های پزشکی موجود در بازار از نظر تحریک آزمایش می‌شوند، و ISO 10993-10 تنها چندین روش آزمایش in vivo را تشریح می‌کند، یافتن یک رویکرد جایگزین در شرایط آزمایشگاهی، مطابق با اصل 3Rها ضروری بود. جایگزین، کاهش، اصلاح) ISO 10993-2:2006: الزامات رفاه حیوانات.

بنابراین، جامعه بین‌المللی درگیر با استانداردهای ISO در چندین سال گذشته تلاش کرده است تا نشان دهد که یک روش سازگار OECD که برای ارزیابی تحریک مواد شیمیایی و آرایشی (OECD 439) در شرایط آزمایشگاهی استفاده می‌شود، می‌تواند به دقت پاسخ‌های تحریک را برای دستگاه‌های پزشکی پیش‌بینی کند. این شامل چندین همکاری جهانی برای توسعه تنظیمات پروتکل مورد نیاز برای ارزیابی دستگاه‌های پزشکی بود که منجر به یک مطالعه دور روبین عظیم با شرکت 18 آزمایشگاه در 9 کشور شد. نتایج نشان داد که روش in vitro به دقت پتانسیل تحریک چندین ماده را که معمولاً در ساخت وسایل پزشکی استفاده می‌شوند شناسایی می‌کند و این روش منجر به داده‌های تکرارپذیر در بین آزمایشگاه‌های مختلف می‌شود.

 مقالات پیشنهادی: 

اندوتوکسین

استریلیتی

بار میکروبی

سمیت سلولی

حساسیت زایی

استاندارد جداگانه: ISO 10993-23

این موفقیت جهانی است که منجر به تغییر در استاندارد تحریک ISO شده است، که اکنون جدا از حساسیت پوست (که در ISO 10993-10 باقی مانده است) در استاندارد جداگانه خود، ISO 10993-23 پوشش داده شده است. روش تحریک آزمایشگاهی از یک مدل اپیدرم انسانی (RhE) بازسازی شده با کراتینوسیت‌های اپیدرمی طبیعی مشتق شده از انسان استفاده می‌کند که برای تشکیل یک مدل چند لایه و متمایز از اپیدرم انسانی کشت داده شده‌اند. دستگاه ها به همان روشی که در روش in vivo انجام می شود استخراج می شوند. پس از دوره استخراج، عصاره مستقیماً روی بافت های RhE اعمال می شود و سپس به مدت 18 تا 24 ساعت انکوبه می شود.

روش in vitro از MTT (3-(4،5-dimethylthiazolyl-2)-2، 5-diphenyltetrazolium bromide) برای تعیین زنده ماندن سلول استفاده می کند. این یک رنگ رایج با واکنش پذیری است که بر اساس کاهش سلولی MTT از زرد به بنفش توسط سلول های زنده است. سپس این تغییر رنگ بر روی یک اسپکتروفتومتر اندازه گیری می شود و با کنترل منفی مقایسه می شود. توجه به این نکته مهم است که اگرچه MTT معمولاً با سنجش سمیت سلولی مرتبط است، این رنگ نیست که سنجش را انجام می دهد، بلکه پیچیدگی سیستم آزمایشی است که برای آن اعمال می شود. بنابراین، در حالی که ما در حال بررسی زنده ماندن سلول هستیم، به جای یک آزمایش سمیت سلولی معمولی، که از یک لایه سلولی تشکیل شده است، از بافت پیچیده است.

با ISO 10993-23، روش in vitro اکنون به عنوان روش آزمایشی ترجیحی برای بررسی اولیه شناخته شده است. با این حال، رایج‌ترین سؤالی که اکنون پرسیده می‌شود این است که «کدام آژانس‌ها/کشورهای نظارتی روش in vitro را می‌پذیرند؟» ورودی کلی از سراسر جهان این است که روش in vitro ترجیح داده می شود و به طور گسترده پذیرفته خواهد شد، حتی زمانی که استاندارد برای گنجاندن و پذیرش رسمی بین المللی ترجمه می شود. ژاپن جلوتر از این بود و آزمایش آزمایشگاهی را قبلاً در سند راهنمای خود گنجانده است. FDA ایالات متحده هنوز به طور رسمی استاندارد جدید را به رسمیت نشناخته است، اما گفتگوهای مستقیم با FDA برای تسهیل پذیرش سریع این روش صورت گرفته است.

از نظر فنی، درست است که تست تحریک در دو استاندارد پوشش داده شده است، ISO 10993-10:2010: تست های تحریک و حساسیت پوست و تست های ISO 10993-23:2021 برای تحریک، در عین حال به روزترین و رایج ترین استاندارد، ISO 10993-23. در نظر گرفته شده است و شامل اطلاعات قابل استفاده برای ارزیابی تحریک از ISO 10993-10 (به این معنی که تمام گزینه های تست in vivo از ISO 10993-10 نیز در ISO 10993-23 گنجانده شده است). بنابراین، رعایت استاندارد ISO 10993-23 مناسب است. علاوه بر این، پیش بینی می شود که ISO 10993-10 به زودی (تابستان 2021) به روز شود تا تمام ارجاعات به نقطه پایانی تحریک حذف شود.

انجام گذار

هنگام پیمایش این انتقال به ISO 10993-23 باید چند نکته را در نظر گرفت. اول، استاندارد جدید ترجیح برای آزمایش آزمایشگاهی را نشان می دهد. این نیز مطابق با ISO 10993-1:2018 است که از الزامات رفاه حیوانات ISO 10993-2 نقل می‌کند: «روش‌های آزمایش آزمایشگاهی، که اعتبار مناسب، منطقی و عملی در دسترس، قابل اعتماد و قابل تکرار هستند، باید برای استفاده در ترجیح به تست های in vivo." به این ترتیب، سازندگان دستگاه‌ها باید برنامه‌های آزمایش زیست سازگاری خود را به روش آزمایشگاهی، که ممکن است شامل بحث با نهاد نظارتی مورد استفاده باشد، تغییر دهند تا اطمینان حاصل شود که روش برای دستگاه(های) موضوع مورد پذیرش قرار می‌گیرد. دوم، آزمایشگاه‌های آزمایشی طبق رویه‌های داخلی خود به استاندارد ISO 10993-23 منتقل می‌شوند، بنابراین شما می‌خواهید تأیید کنید که استاندارد ذکر شده در پروتکل‌های آزمایش با مستندات داخلی شما مطابقت دارد.

این حرکت از آزمایش‌های تحریک‌پذیری in vivo به آزمایشگاهی در صنعت تجهیزات پزشکی کار کوچکی نیست. کارشناسان در سراسر جهان تقریباً یک دهه است که برای تحقق این امر همکاری کرده اند. درک روش آزمایش جدید، وضعیت فعلی و پیش‌بینی‌شده دو استاندارد مربوطه (ISO 10993-10 و ISO 10993-23) و نحوه انتقال از آزمایش تحریک درون تنی به آزمایشگاهی برای سازندگان تجهیزات پزشکی ارزشمند است.

یک برد مضاعف

هدف نهایی در ارزیابی تحریک، محافظت از ایمنی بیمار است که با نشان دادن قابلیت مقایسه بین دو گزینه اصلی آزمایش ثابت شده است.

  آزمون تحریک زایی