آزمون استریلیتی

تست استریلیتی یک الزام تست میکروبیولوژی GMP است که برای تأیید عدم وجود میکروارگانیسم های زنده در محصولات استریل بیمار استفاده می شود. روش‌های آزمایش استریلیتی باید تا حد امکان دقیق باشند، زیرا برای دستگاه‌های پزشکی، محصولات دارویی، و فرمول‌بندی‌ها، مواد بافتی و سایر محصولاتی که ادعا می‌کنند استریل یا عاری از میکروارگانیسم‌های زنده هستند، اهمیت دارند.

روش‌های تست استریلیتی برای محصولات در بسیاری از صنایع، از جمله تولیدکنندگان مواد غذایی و نوشیدنی‌ها اعمال می‌شود، اما صنایع اصلی بخش‌های دارویی و پزشکی هستند که در آن‌ها آزمایش محصولات برای میکروبیولوژیست‌ها یک وظیفه حیاتی و معمول است.

   برای کسب اطلاعات بیشتر و دریافت خدمات با ما تماس بگیرید.

خدمات تست استریلیتی ما

آزمایش‌های استریلیتی توسط تیم متخصصان میکروبیولوژی ما انجام می‌ شود تا اثر بخشی فرآیند استریل ‌سازی را مطابق با استانداردهای ISO یا برای تأیید اثربخشی فرآیند تولید آسپتیک تأیید کند.

گروه ما با استفاده از فیلتراسیون غشایی، غوطه وری مستقیم (تلقیح) یا حذف میکروارگانیسم ها از محصول، آزمایش استریلیتی را مطابق استانداردهای ISO انجام می دهد. این تکنیک ها را می توان برای کل محصول یا بخشی از محصول یا عبور مایع اعمال کرد. نیاز به استفاده از یک تکنیک یا تکنیک دیگر به ویژگی های محصول و نیازهای مشتری بستگی دارد.

تست استریلیتی

آزمایش استریلیتی به سه دلیل انجام می شود:

تست استریلیت (USP/EP): برای تأیید اینکه الزامات استریلی یک محصول پس از قرار گرفتن در معرض فرآیند استریلیزاسیون یا تولید آسپتیک برآورده شده است.

تست استریلیتی (ISO): برای واجد شرایط بودن حداقل دوز تابش لازم برای دستیابی به یک سطح تضمین استریلیتی مشخص (SAL).

تست استریلیتی نمونه‌های تایید صلاحیت درمان EO سطح زیر کشنده (ISO) برای ایجاد و اثبات رابطه بین BI و بار میکروبی طبیعی محصولات.

نیکوفارمد ارائه می دهد:

• تست استریلیتی بر اساس ISO
• طیف وسیعی از اتاق های تمیز کلاس VI و کلاس VII برای ارائه تست هدفمند و با کیفیت بالا در دسترس هستند.
• انتخاب و طراحی روش های سفارشی
• پروتکل های کامل محصول خاص (در صورت درخواست ارائه می شود)
• تست کفایت روش (باکتریوستاز و قارچ (B/F))
• به حداقل رساندن اثرات بازدارنده در آزمایش (خنثی کردن فعالیت ضد میکروبی)
• آزمایش استریلیتی بر روی محصولات بزرگ یا پیچیده، به عنوان مثال محصولاتی با ظرفیت بیش از 20 لیتر در هر نمونه

تست های استریلیتی برای موارد زیر استفاده می شود:

• در پزشکی با ادعای استریلیتی
• داروسازی
• محصولات دارویی
• مواد خام
• بسته بندی (برای بخش های غذایی/ پزشکی/ داروسازی)
• مواد خام

تست های استریلیتی

نیکوفارمد ارائه دهنده پیشرو خدمات تست تضمین استریلیتی به تولید کنندگان تجهیزات پزشکی، دارو و بافت برای محصولات استریل است.

خلاصه خدمات

برای سهولت یافتن خدمات آزمایش کنترل کیفیت معمول، پیوندهای زیر ممکن است شامل خدمات آزمایشی باشند که به طور سنتی با برنامه‌ های تضمین استریلیتی مرتبط نیستند، اما با خدمات آزمایش معمول برای بسیاری از دستگاه ‌های پزشکی و دارویی سازگار هستند.

برای سهولت یافتن خدمات آزمایش کنترل کیفیت معمول، پیوند های زیر ممکن است شامل خدمات آزمایشی باشد که به طور سنتی با برنامه‌ های تضمین استریلیتی مرتبط نیستند، اما با خدمات آزمایش معمول برای بسیاری از دستگاه ‌های پزشکی و همچنین محصولات دارویی سازگار هستند.

آزمایش بار زیستی تعداد کل میکروارگانیسم‌ های زنده را در روی یک ظرف یا جزء پزشکی تعیین می ‌کند. معمولاً روی هر محصولی که به کنترل و یا نظارت بر شمارش بار زیستی به عنوان بخشی از برنامه استریل‌ سازی نیاز دارد، انجام می‌شود. این آزمایش به عنوان یک سیستم هشدار اولیه برای مشکلات احتمالی تولید که می تواند منجر به استریلیتی سازی نامناسب شود، عمل می کند. همچنین برای محاسبه دوز مورد نیاز برای استریلیزاسیون موثر پرتو و نظارت منظم بر محصول به عنوان بخشی از بازرسی های دوز سه ماهه استفاده می شود.

برای روشن شدن، بار زیستی محصول برای وسایل، ظروف و اجزای پزشکی است. با این حال، ما به علاوه تعداد صفحات استاندارد و مطالعات شمارش میکروبی را برای محلول‌ها، پودرها و همچنین محصولات مشابه که ممکن است نیاز به فیلتراسیون و بازسازی باشد، ارائه می‌ کنیم. محصولات پارچه ای را نیز می توان از نظر بار زیستی ارزیابی کرد.

مقالات بیشتر:

بایو بردن

مواد غذایی

گیاهان دارویی

ادویه جات

آزمون تعیین بار میکروبی 

استریلیتی محصول و استریلیتیBI

نیکوفارمد با ارائه آزمایش‌ های استریلیت اتاق تمیز و جداسازی سنتی، فقط می‌ تواند به مشتریانی که دارای امکانات آزمایشی مناسب برای برآورده کردن نیازهای تست استریلی شما هستند کمک کند. اتاق های تمیز اغلب برای وسایل پزشکی و برخی از محصولات دستمال کاغذی استفاده می شود. جداسازها اغلب برای محصولات تزریقی و دارویی استفاده می شوند که به صورت آسپتیک فرآوری می شوند و تحمل کمی برای شکست تست استریلی دارند یا اصلاً تحمل نمی کنند.

آزمایش استریلیتی باید با استفاده از آزمایش مناسب بودن روش (باکتریوز/ قارچ ‌زنی یا B/F) تأیید شود. برای محصولات آزمایش شده در نصب ایزولاتور، اعتبار سنجی بسته بندی نیز باید انجام شود تا فرآیند آلودگی زدایی مرتبط با قرار دادن محصول در ایزولاتور ارزیابی شود.

یک جایگزین یا نشانگر ممکن است برای برخی از فرآیندهای استریلیتی سازی استفاده شود. رایج ترین استفاده از نشانگر بیولوژیکی (BI) یا نوار ورزشی باعث صرفه جویی در زمان تست و هزینه محصول می شود. تست استریلیتی BI در نیکوفارمد مشابه استریل بودن محصول انجام می ‌شود، اما به زمان انکوباسیون کوتاه‌تر و محیط کم ‌حجم نیاز دارد، که امکان تست استریلیتی مقرون ‌به‌ صرفه ‌تری را برای تایید بار استریل ‌سازی محصول فراهم می‌ کند.

اندوتوکسین های باکتریایی

نیکوفارمد تست اندوتوکسین باکتریایی  را نیز ارائه می دهد، یک آزمایش آزمایشگاهی می باشد که برای تشخیص و همچنین تعیین کمیت اندوتوکسین های باکتریایی، که جزء دیواره سلولی باکتری های گرم منفی هستند. BET به عنوان بخشی از آزمایش آزا دسازی دسته ای برای دستگاه های پزشکی که تماس مستقیم یا غیرمستقیم با سیستم قلبی عروقی، سیستم لنفاوی یا مایع مغزی نخاعی دارند، انجام می شود. داروهای تزریقی نیز باید از نظر اندوتوکسین های باکتریایی آزمایش شوند. نظارت منظم بر سیستم‌ های آب و مواد ورودی می ‌تواند اطمینان حاصل کند که این فرآیند اندوتوکسین‌ ها را به محصول نهایی اضافه نمی‌ کند.

تجزیه و تحلیل ذرات

آزمایش‌های آنالیز ذرات شامل روش ‌هایی برای حذف، شمارش و اندازه ‌گذاری آلاینده‌ های ذرات روی یا در دستگاه‌ های پزشکی، استنت‌ ها، کاتترها، داروها، کیسه‌ های داخل وریدی و محلول ‌های لنز تماسی است. این آزمایش برای تعیین میزان ذرات معلق از محیط تولید و استفاده از دستگاه پزشکی یا محصول دارویی و همچنین شناسایی منابع احتمالی ذرات مفید است.

بقایای استریل کردن

فرآیند های استریل کردن ممکن است پس از فرآیند استریل کردن، بقایایی در محصول باقی بگذارند. برای فرآیندهایی مانند باقیمانده استریل کننده،  اکسید اتیلن (EO)، زمان هوادهی و سطوح ایمنی باید ارزیابی شود. نیکوفارمد آزمایش باقیمانده غیر استریل را برای EO، H202OXNUMX و سایر باقیمانده‌های رایج فرآیند استری ل‌سازی ارائه می‌دهد.

تعاریف میکروبی

تست‌ های شناسایی میکروبی یا ارگانیسم ‌ها برای مشخص کردن بار میکروبی محصول ویا بار زیستی محیطی و شناسایی ارگانیسم ‌ها در نتایج استریلیتی مثبت استفاده می‌شوند. برای محصولات دستمال کاغذی، تأیید وجود یا عدم وجود ارگانیسم های احتمالی نامطلوب نیز ممکن است انجام شود. نیکوفارمد از تعاریف ژنوتیپی با استفاده از رنگ ‌آمیزی گرم سنتی و سایر تکنیک‌ های آزمایشگاهی استفاده می ‌کند.

خدمات آزمایش مواد مخدر سیستماتیک

نیکوفارمد ویژه تولید کنندگان دارو، آزمایش‌های معمول USP و EP را برای استریلیتی محصول (ایزولاتور)، اندوتوکسین باکتریایی، آنالیز ذرات، آزمایش فعالیت آنتی‌بیوتیکی (APA)، مطالعات دارویی اثر حفاظتی ضد میکروبی (APE) و خدمات شناسایی میکروبی ارائه می‌کند. برای محصولات دارویی غیر استریل مانند چسب های ترانس درمال، ما همچنین مطالعات معمول شمارش میکروبی را برای ارگانیسم های نامطلوب ارائه می دهیم.

خدمات معمول آنالیز بافت

نیکوفارمد ویژه پردازش و حفظ بافت، آزمایش ‌های معمول را برای مطالعات تعداد میکروبی برای ارزیابی آفات و آزمایش‌ های استاندارد بافت بار زیستی برای ارزیابی‌ های عمومی بار زیستی ارائه می ‌کند. تعاریف میکروبی نیز می تواند برای توصیف بار زیستی و نوع ارائه شود. مسائل منحصر به فرد در محصولات بافتی، به ویژه مهار به دلیل استفاده از آنتی بیوتیک ها برای حفظ مواد بافتی ایجاد می شود، که باید قبل از انجام آزمایش های معمول خاص توسط یک مطالعه مهارت تایید شود.

نیکوفارمد با تیم بسیار متخصص و آزمایشگاه‌های معتبر بین‌المللی، تست استریلیت کلیه خدمات تست، تجزیه و تحلیل، اندازه‌ گیری، ارزیابی و گزارش را به صورت جامع و قابل اعتماد انجام می‌ دهد.

 استریلیتی| صحه گذاری استریلیتی

آزمون  سمیت سلولی چیست؟

آزمون سمیت سلولی (Cytotoxicity Test) یکی از مهم‌ترین تست‌های زیست‌سازگاری است که برای ارزیابی اثرات سمی یک ماده بر سلول‌ها انجام می‌شود. این تست به‌طور گسترده در صنایع دارویی، پزشکی، و بیوتکنولوژی برای بررسی ایمنی و سازگاری مواد مختلف مورد استفاده قرار می‌گیرد.

سه نوع تست سمیت سلولی در سازمان بین المللی استاندارد  بیان شده است:

آزمایش های عصاره، تماس مستقیم و تماس غیر مستقیم

سیستم تجزیه و تحلیل سلولی در زمان واقعی پتانسیل قابل توجهی را در رابطه با سمیت سلولی در سال های اخیر نشان می دهد. بررسی حاضر بینشی مختصر در مورد آزمایش سمیت سلولی آزمایشگاهی دستگاه‌های پزشکی ارائه می‌کند.

 بر اساس اعلام سازمان بین المللی استاندارد (ISO) دستگاه های پزشکی علاوه بر خواص مکانیکی، فیزیکی و شیمیایی و یا میزان خوب بودن آنها در صورت تماس با بدن، باید تحت آزمایش های دقیق قرار گیرند تا زیست سازگاری آنها مشخص شود. 

جهت دریافت خدمات و مشاوره رایگان تماس بگیرید.

ارزیابی  کردن بیولوژیکی دستگاه‌ های پزشکی : آزمایش‌ های سمیت سلولی در آزمایشگاه

هیچ کس نمی‌خواهد با محصولات سمی یا مضر تماس پیدا کند، حتی اگر یک وسیله پزشکی باشد. در صورتی که محصول خاصیت آسیب رساندن یا تخریب سلول ها را داشته باشد، به آن سمیت سلولی می گویند. با این حال، سازندگان همیشه اطلاعات دقیق کافی از زنجیره تامین ندارند تا بتوانند سازگاری مواد را ارزیابی کنند - اینجاست که تست سمیت سلولی شرح داده شده در استاندارد ISO وارد عمل می شود. این یک آزمایش نسبتاً ارزان است که از محبوبیت زیادی برخوردار است و اغلب مورد استفاده قرار می گیرد - همچنین به این دلیل که سمیت سلولی طبقISO تقریباً برای همه محصولات باید ارزیابی شود. بنابراین انجام آزمایش سمیت سلولی در مرحله توسعه برای شناسایی مواد مناسب و بعداً روی دستگاه نهایی (در صورت وجود استریل، در بسته بندی) ، مشخصات شیمیایی، منطقی است. تا بتوان نتایج را به وضوح تفسیر کرد و یک بیانیه قابل اعتماد بیان کرد.

انواع تست‌های سمیت سلولی

آزمون MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide)

• روش: این آزمون بر اساس فعالیت آنزیمی است که سلول‌های زنده به نام MTT را به فرم رنگی برایmazan تبدیل می‌کنند. میزان تبدیل MTT به فرم رنگی به تعداد سلول‌های زنده بستگی دارد.
• نتایج: کاهش در جذب رنگ نشان‌دهنده سمیت سلولی است، زیرا سلول‌های زنده کمتر قادر به تبدیل MTT هستند.

آزمون XTT (Sodium 3'-[1-(phenylamino)-carbonyl]-3,4-tetrazolium-bis (4-methoxy-6-nitro) benzene sulfonic acid)

• روش: مشابه آزمون MTT، XTT به صورت رنگی تغییر می‌کند. سلول‌های زنده آن را به فرم رنگی تبدیل می‌کنند که میزان آن به تعداد سلول‌های زنده بستگی دارد.
• نتایج: مقدار رنگ تولید شده مستقیماً به تعداد سلول‌های زنده مرتبط است و کاهش آن نشان‌دهنده سمیت است.

آزمون LDH (Lactate Dehydrogenase)

• روش: این آزمون به سنجش فعالیت آنزیم LDH در محیط کشت سلول‌ها می‌پردازد. LDH معمولاً درون سلول‌ها وجود دارد و در صورت آسیب به غشای سلولی به محیط کشت می‌ریزد.
• نتایج: افزایش سطح LDH در محیط کشت نشان‌دهنده آسیب به سلول‌ها و سمیت است.

آزمون Trypan Blue Exclusion

• روش: در این آزمون، سلول‌ها با رنگ‌دانه Trypan Blue که فقط سلول‌های مرده را رنگی می‌کند، مخلوط می‌شوند. سلول‌های زنده رنگ نمی‌گیرند.
• نتایج: شمارش سلول‌های رنگی (مرده) نسبت به کل سلول‌ها برای ارزیابی میزان سمیت استفاده می‌شود.

آزمون Comet Assay

• روش: این آزمون برای بررسی آسیب DNA در سلول‌ها به کار می‌رود. سلول‌ها تحت شرایط خاصی پردازش و سپس با استفاده از الکتروفورز، آسیب DNA ارزیابی می‌شود.
• نتایج: الگوهای آسیب DNA (شبیه به دنباله دنباله) در سلول‌ها نشان‌دهنده سمیت و آسیب ژنتیکی است.

آزمون CellTiter-Glo

• روش: این آزمون برای اندازه‌گیری ATP (آدنوزین تری‌فسفات) که فقط در سلول‌های زنده تولید می‌شود، طراحی شده است. مقدار ATP اندازه‌گیری شده به تعداد سلول‌های زنده بستگی دارد.
• نتایج: کاهش در مقدار ATP نشان‌دهنده کاهش تعداد سلول‌های زنده و سمیت سلولی است.

مراحل انجام تست سمیت سلولی

1. آماده‌سازی نمونه:

   • نمونه‌ای از ماده یا ترکیب مورد آزمایش تهیه و به غلظت‌های مختلف رقیق می‌شود.

2. کشت سلول:

   • سلول‌های مناسب برای آزمون کشت می‌شوند و به محیط کشت مناسب منتقل می‌شوند.

3. تماس با ماده:

   • سلول‌ها به مدت معین در معرض ماده مورد آزمایش قرار می‌گیرند.

4. اندازه‌گیری:

   • پس از انکوباسیون، تست‌های سمیت سلولی مختلف انجام می‌شود تا تعداد سلول‌های زنده و میزان آسیب بررسی شود.

5. تحلیل داده‌ها:

   • داده‌های به دست آمده از تست‌ها تحلیل می‌شود تا تعیین گردد که آیا ماده مورد آزمایش سمیت سلولی دارد یا خیر.

6. گزارش‌دهی:

   • نتایج آزمون‌ها در یک گزارش جامع مستند می‌شود که شامل تحلیل‌های آماری و تفسیر داده‌ها است.

آزمایش با تماس مستقیم سلول/ماده، و همچنین تست با تماس غیر مستقیم سلول/ماده.

بسته به نوع نمونه، کاربرد و محل های کاربردی احتمالی، یک یا چند روش از آزمون های ذکر شده انتخاب می شود. آزمون‌ها و نقاط پایانی گوناگونی وجود دارد و بسته به نوع اندازه‌گیری، معیارهای ارزیابی متفاوتی ممکن است اعمال شود:

تخمین آسیب سلولی ناشی از تغییرات مورفولوژیکی

اندازه گیری آسیب سلولی - ارزیابی بسته به مواد مورد استفاده

اندازه گیری رشد سلولی

اندازه گیری جنبه های خاص متابولیسم سلولی.

خواص مواد به طور خاص می تواند بر برنامه ریزی و اجرای آزمایش دقیق تأثیر بگذارد. به عنوان مثال، در مورد اسپندکس، از یک پروتکل تست متفاوت استفاده می شود که ویژگی های خاص را در نظر می گیرد.

مقالات بیشتر:

تست زیست سازگاری

تست سمیت سلولی

آزمون سمیت ژنی

خدمات تست سمیت سلولی توسط نیکوفارمد

آزمایشگاه نیکوفارمد با ارائه خدمات تست سمیت سلولی با کیفیت و دقت بالا، نقش مهمی در ارزیابی ایمنی و زیست‌سازگاری مواد مختلف ایفا می‌کند. این آزمایشگاه با استفاده از تکنولوژی‌های پیشرفته و تیم متخصص، تضمین می‌کند که نتایج تست‌ها مطابق با بالاترین استانداردهای بین‌المللی بوده و اطلاعات لازم برای بهبود و توسعه محصولات ایمن و کارآمد را فراهم می‌سازد.

سنجش های کمی

سنجش لوسیفراز-ATP - زنده ماندن سلولی یک بازخوانی جایگزین برای سمیت سلولی است. لوسیفراز آنزیمی است که معمولا مورد استفاده قرار می گیرد که لوسیفرین را در حضور ATP به اکسی لوسیفرین تبدیل می کند.ATP در سلول های زنده یافت می شود و متناسب با تعداد سلول های زنده موجود است. این سنجش با فرمت های با توان بالا سازگار است. همچنین یک بازخوانی حساس از سمیت سلولی در سلول های مختلف است. سنجشMTT – در سنجش سمیت سلولی MTT از رنگ 3-(4،5-دی متیل تیازول-2-ایل)-2،5-دی فنیل تترازولیوم بروماید استفاده می شود که معمولاً به عنوانMTT شناخته می شود.MTT یک ترکیب محلول در آب زرد رنگ است که توسط سوکسینات دهیدروژناز میتوکندری تقسیم می شود و باعث ایجاد فرمازان بنفش رنگ می شود. تبدیلMTT به فرمازان فقط در سلول های زنده اتفاق می افتد.

سنجش های کیفی

سنجش‌های کیفی، مانند سنجش شستشوی MEM، آزمایش تماس مستقیم، و آزمایش انتشار آگار به ندرت استفاده می‌شوند. در این سنجش‌ها، سلول‌ها در معرض یک دارو یا ترکیب قرار می‌گیرند و تغییر شکل سلولی به صورت بصری، در مقیاس از پیش تعیین‌شده، ارزیابی می‌شود.

کیت های سنجش سمیت سلولی

کیت‌های سنجش سمیت سلولی برای اندازه‌گیری از دست دادن یکپارچگی ساختاری یا عملکردی که با مرگ سلولی مرتبط است، طراحی شده‌اند. بسیاری از سنجش های سمیت سلولی با شناسایی غشاهای سلولی آسیب دیده عمل می کنند. این کار با استفاده از رنگ غیرقابل نفوذ غشا یا با تشخیص اجزای سلولی که معمولاً در خارج از سلول یافت نمی شوند، مانند لاکتات دهیدروژناز (LDH) یا DNA انجام می شود. سنجش‌های سمیت سلولی برای مطالعه اینکه چگونه جمعیت‌های سلولی ممکن است تحت تأثیر عوامل مختلف، مانند عوامل دارویی و کاندیدای دارو قرار گیرند، مفید هستند.

دستگاه های پزشکی به طور گسترده ای در رشته های مختلف بالینی مورد استفاده قرار گرفته اند. از آنجایی که این وسایل تماس مستقیم با بافت ها و سلول های بدن دارند، نه تنها به خواص فیزیکی و شیمیایی خوبی نیاز دارند، بلکه باید زیست سازگاری خوبی نیز داشته باشند. امنیت تجهیزات پزشکی توسط دولت ها افزایش یافته است. مجموعه ای از استانداردهای بین المللی برای تجهیزات پزشکی (ISO) توسط ISO در سال 1992 منتشر شد بنابراین ایمنی در تحقیقات، تولید و استفاده بالینی را تضمین کردند. در بین تست های زیست سازگاری، سمیت سلولی به عنوان یک آزمایش پروژه آزمایشی و به عنوان یک شاخص مهم برای ارزیابی تجهیزات پزشکی ترجیح داده می شود، زیرا ساده، سریع، دارای حساسیت بالا است و می تواند حیوانات را از سمیت نجات دهد.

سنجش سمیت سلولی در شرایط آزمایشگاهی با تماس مستقیم با سلول

انجام آزمایش تماس مستقیم سلولی امکان ارزیابی کردن کیفی پتانسیل سیتوتوکسیک یک مورد آزمایشی را در تطابق با ISO فراهم می نماید. آزمایش با قرار دادن آیتم آزمایشی روی تک لایه سلول ها انجام می شود. مواد سیتوتوکسیک آزاد شده از آیتم آزمایشی ممکن است باعث تغییر شکل یا حتی لیز سلول‌های زیر یا اطراف آیتم آزمایش شوند که می‌تواند به صورت میکروسکوپی ارزیابی شود.

مقالات بیشتر:

تست اندوتوکسین چیست

ساخت اتاق تمیز

عملکرد اندوتوکسین

ضدعفونی تجهیزات پزشکی

ارزیابی سمیت سلولی با ارزیابی میکروسکوپی پس از تماس مستقیم با سلول

نمونه های آزمایش و شاهد بر روی تک لایه سلولی از پیش کاشته شده بدون برهم زدن یکپارچگی تک لایه سلولی قرار می گیرند و در دمای 1±37 درجه سانتی گراد به مدت حداقل 24 ساعت انکوبه می شوند. بدشکلی، دژنراسیون، جدا شدن یا لیز سلول ها به عنوان اقداماتی برای سمیت سلولی استفاده می شود. واکنش بیولوژیکی در مقیاس 0 تا 4 توصیف و رتبه بندی شده است. در صورتی که پاسخ به ماده آزمایشی از درجه 2 (با واکنش خفیف) بیشتر نباشد، مورد آزمایشی الزامات آزمون را برآورده می کند.

تست های سمیت سلولی در سلول های پستانداران، پروکاریوتی (آزمون ایمز)

سنجش حیات سلولی در سلول های پستانداران و باکتری ها

ترکیبات شیمیایی، داروها، محصولات آرایشی و بهداشتی، عصاره های گیاهی طبیعی یا موادی که برای کاشت ایمپلنت استفاده می شوند می توانند اثر سمی بر سلول های باکتریایی یا پستانداران داشته باشند. مکانیسم های مختلفی برای سمیت وجود دارد، به عنوان مثال، از دست دادن یکپارچگی غشاء، سمیت لیزوزومی، مهار سنتز پروتئین یا تداخل در متابولیسم که با فناوری های مختلف قابل تشخیص است.

نه تنها برای توسعه داروها، لوازم آرایشی، عصاره های گیاهی یا مواد شیمیایی و ایمپلنت، بلکه برای محیط زیست نیز مهم است که بین عدم سمیت، سمیت ناچیز و قوی تمایز قائل شود. به عنوان مثال، ترکیباتی با فعالیت بیولوژیکی امیدوارکننده و سمیت سلولی ناچیز را نباید رد کرد، زیرا "دوز سم را می سازد"، یعنی همه چیز سم است و هیچ چیز بدون سم نیست، دوز به تنهایی باعث می شود که یک چیز یک چیز نباشد.

سنجش های زیستی مختلف و چندین رده سلولی یوکاریوتی و پروکاریوتی مختلف برای ارزیابی سمیت سلولی استفاده می شود. سنجش‌های سمیت سلولی تغییرات سلولی یا متابولیکی مرتبط با سلول‌های زنده یا غیرقابل زنده را تشخیص می‌دهند. سنجش‌های مختلف می‌توانند مکانیسم‌های مختلفی را در سلول‌ها شناسایی کنند، مانند فعالیت‌های بیوشیمیایی در زنجیره انتقال الکترون، سنتز پروتئین، فعالیت لیزوزومی یا از دست دادن یکپارچگی غشاء، که نشانه‌های نشان‌دهنده سلول‌های زنده هستند.

به عنوان مثال، نمک‌های تترازولیوم مانند XTT یا سایر قالب‌های ردوکس ابزار ارزشمندی برای ارزیابی سلول‌های کمی زنده هستند، زیرا رنگ‌ها تنها توسط سلول‌های فعال متابولیک کاهش می‌یابند.

تست استریلیتی: تست استریلیتی برای نشان دادن استریل بودن یک محصول دارویی یا دستگاه پزشکی استفاده می‌شود. آزمایشگاه نیکوفارمد آریا به شما در تعیین نحوه آزمایش محصول خود مطابق با استانداردهای حاکم برای این آزمایش‌ها کمک می‌کند.

در تست استریلیتی به روش بسته محصولات در صورتی که مایع باشند از طریق یک غشاء در یک سیستم بسته فیلتر می‌شوند. برای تجهیزات پزشکی استریل و سایر محصولات جامد از این قبیل از روش تلقیح مستقیم برای آزمایش استریل بودن محصول استفاده می‌شود. همه محصولات برای تست استریلیتی در ناحیه تمیز با گرید A آزمایش می‌شوند.

برای کسب اطلاعات بیشتر و دریافت خدمات با ما تماس بگیرید.

از آن جایی که از تولیدکنندگان دستگاه های پزشکی خواسته می شود تا استریل بودن دستگاه های خود را نشان دهند، تست استریلیتی سازی بخشی ضروری از هر اعتبار سنجی استریلیزاسیون و همچنین برای کنترل معمول کیفیت دستگاه های پزشکی است.

تمام محصولات دارویی باید از کیفیت بالا و به طور گسترده ایمن باشند تا توسط کادر پزشکی برای بیماران استفاده شود. در غیر این صورت می تواند مشکلاتی را برای بیماران ایجاد کند. تست استریلیتی اطمینان می دهد که محصول داده شده به طور مناسب استریل است. بنابراین می توان آن را برای استفاده بیشتر ارسال کرد. این تست ها برای کنترل کیفیت و اطمینان از استریل بودن کامل محصول بسیار مهم هستند.

اما قبل از اینکه تست استریلی محصولات دارویی را انتخاب کنید، باید همه چیز را در مورد استریلیتی و آزمایشات آن بدانید.

استریلیتی چیست؟

به طور کلی، استریلیتی به معنای عدم وجود هر گونه میکروارگانیسم شامل باکتری هوازی، باکتری بی‌هوازی و یا قارچ زنده است. همین تعریف در مورد محصولات دارویی نیز صدق می‌کند، زیرا برای استریل بودن باید عاری از هرگونه آلودگی باشند. اما این حالت از همان ابتدای تولید وجود ندارد. برای دستیابی به استریلیتی در هر محصول، باید فرآیندی به نام استریلیزاسیون انجام شود. برخلاف ضدعفونی کردن، این روش شامل از بین بردن کامل هر گونه باکتری موجود در محصول است.

فرآیند استریلیزاسیون درست پس از آماده شدن محصول انجام می‌شود. به علاوه، محصولات مختلف بسته به ماهیت و ساخت، به روش‌‌های استریلیزاسیون متفاوتی نیاز دارند.

تست استریلیتی محصولات دارویی

بررسی استریل بودن محصولات بدون بررسی مناسب بودن روش‌های تست استریلیتی امکان‌پذیر نیست. آزمایش استریلیتی به بررسی این که نمونه داده شده برای این که آیا کاملاً استریل است یا خیر کمک می‎کند.

بررسی این که آیا فرآیند استریلیزاسیون انجام شده واقعاً مناسب است یا خیر

تولیدکنندگان می‎توانند از طریق تست استریل محصولات دارویی از کیفیت محصول استریل خود اطمینان حاصل کنند. با توجه به این که نمی‌توان تمام محصولات تولید شده را از نظر استریل بودن بررسی کرد، به همین دلیل چند نمونه از بحر تولید شده گرفته شده و از نظر استریل بودن بررسی می‌شود. اگر اندازه نمونه به درستی انتخاب شود، شانس یافتن محصولات آلوده به میزان قابل توجهی افزایش می‌یابد و در صورت تایید تست استریلیتی محصول مربوطه ایمن اعلام می‌شود.

گاهی امکان آلودگی محصول با میکروارگانیسم‌‌های خاصی در حین و یا پس از انجام استریلیزاسیون وجود دارد. بنابراین طی آزمون استریلیتی میکروارگانیسم آلوده کننده رشد میکروبی را بروز داده و بنابراین، نمی‌توان محصول مربوطه را ایمن اعلام کرد. این نتیجه نشان می‌دهد که محصول کاملاً استریل نیست. در این صورت، فرآیندهای حین استریلیزاسیون و یا پس از آن که توسط سازنده انجام می‌شود باید بازنگری شده و بهبود یابد تا در آینده چنین مشکلی مجدداً پیش نیاید.

روش‎های تست استریلیتی در آزمایشگاه‌ها

بسیار مهم است که آزمایش استریلیتی فقط تحت نظارت متخصصان و در یک آزمایشگاه تمیز انجام شود. در غیر این صورت، میکروارگانیسم‌ها می‌توانند حتی در مرحله آزمایش استریلیتی محصول را آلوده کنند. از این رو، نتیجه آزمون استریلیتی در یک محیط غیرمعتبر دقیق نخواهد بود و تداخلات بسیاری به همراه خواهد داشت. به همین دلیل است که این آزمایش‌ها باید در نواحی معتبر انجام شود تا تجزیه و تحلیل صحیح و کامل محصول با نتایج قابل اعتماد به دست آید.

این آزمایشگاه‌ها عموماً به صورت تمیز و عاری از هرگونه آلودگی نگهداری می‌شوند. به همین دلیل محیط آن‌ها برای انجام تست استریلیتی محصولات دارویی مناسب است. به علاوه، متخصصان اطمینان حاصل می‌کنند که هیچ مشکلی قبل، حین یا بعد از انجام تست رخ نمی‌دهد.

تست استریلیتی در آزمایشگاه نیکوفارمد آریا

ما آزمایشگاه‌های پیشرفته‌ای داریم که در آن کارکنان متخصص ما تست استریلیتی محصولات دارویی را انجام می‌دهند. ما در طی سالیان اخیر این آزمایش‌ها را در حوزه تولید استریل صنایع مختلف انجام داده و همیشه خدمات قابل اعتمادی را به همه مشتریان خود ارائه کرده‌ایم.

مقالات بیشتر :

• تست بار زیستی
• صحه گذاری بایوبردن
• تست بایوبردن
• آزمون استریلیتی

تست‌های استریلیتی با استفاده از فیلتراسیون غشایی یا تلقیح مستقیم

تست استریلیتی محصولات دارویی ترجیحاً با روش فیلتراسیون غشایی انجام می‎شود. اندازه منافذ فیلترها 0.45 میکرومتر است، مشروط بر این که محصول قابل فیلتراسیون باشد. اگر محصول مستقیماً قابل فیلتر نباشد، می‎توان آن را قبل از فیلتر کردن در حلال آبی یا روغنی حل یا رقیق کرد. در این مورد ضروری است که اطمینان حاصل شود که حلال مورد استفاده دارای خواص ضدمیکروبی نیست، زیرا این امر بر نتیجه تست استریلیتی تاثیر می‌گذارد. اگر محصول قابل حل نباشد نیست (مانند ایمپلنت، مواد بخیه جراحی)، آزمایش استریلیتی با استفاده از تلقیح مستقیم انجام می‎شود، یعنی محصول مستقیماً در محیط کشت قرار می‌گیرد. آزمایشگاه نیکوفارمد آریا آمادگی ارائه هر گونه مشاوره به شما مشتریان گرامی را دارد تا بررسی کنید که کدام روش تست استریلیتی برای محصول شما مناسب‌تر است.

اعتباربخشی تست استریلیتی

اگر نتایج آزمون به دست آمده معتبر باشد، کنترل‌های مناسب ضروری است. از این رو، آزمایش‎های اعتباربخشی یا مناسب بودن تست استریلیتی علاوه بر پایش محیطی و انجام تست کنترل منفی مهم هستند. این تست‌ها زمانی انجام می‎شود که یک محصول جدید برای اولین بار آزمایش می‌شود یا شرایط آزمایش تغییر کرده است. آزمایش‎‌های عملکرد برای تأیید این موضوع است که آیا فعالیت ضدمیکروبی محصول مورد آزمایش به اندازه کافی حذف شده است یا خیر. برای این منظور، به همان روشی که آزمایش محصول واقعی انجام می‌شود، مقدار تعریف شده‌ای از میکروارگانیسم‎های دارای قابلیت تکثیر به فیلتر یا به محیط کشت که محصول در آن قرار می‌گیرد، اضافه می‌شود. «مناسب بودن روش» از طریق مقایسه رشد میکروبی با یک آزمون کنترل مثبت همزمان بررسی می‌شود. اگر هر دو محیط کشت (با و بدون محصول) نشان دهنده رشد مشابهی باشند، آزمون اعتباربخشی قابل قبول است. اگر محیط کشت با محصول نسبت به کنترل مثبت رشد کمتری نشان دهد، خواص ضدمیکروبی محصول به اندازه کافی حذف نشده است. در این مورد، شرایط آزمایش باید اصلاح شود. ما با اطمینان کامل این اعتبار سنجی‌ها را برای شما انجام خواهیم داد. لطفا برای مشاوره جامع در مورد هر یک از درخواست‌های خود با ما تماس بگیرید.

اتاق تمیز تست استریلیتی

محیطی که در آن تست استریلیتی انجام می‎شود می‎‏‎‎‌تواند بر نتیجه کلی آزمایش تأثیر بگذارد. بنابراین، این آزمایش‌ها باید در اتاق تمیزی انجام شود که حاوی هوای فیلتر شده باشد تا شرایط تمیزی حفظ شود.

علاوه بر ایجاد کنترل‌‎های ناحیه آزمون، کسانی که آزمایش را انجام می‌‌دهند نیز باید لباس‌ و دستکش استریل بپوشند تا شرایط اتاق تا حد امکان آسپتیک باشد تا از آلودگی تصادفی نمونه‌ها در هنگام انجام آزمایش جلوگیری شود.

آزمون حساسیت زایی پوستی (Skin Sensitization Test):

آزمون حساسیت زایی پوستی یکی از آزمون­های زیست سازگاری است که بصورت درون تنی (in vivo) مطابق با استاندارد بین المللی ISO 10993-10 در مجموعه آزمایشگاه نیکوفارمد بر روی خوکچه­های هندی آلبینو و موش آزمایشگاهی انجام می­گیرد.

وسایل و تجهیزات پزشکی، محصولات آرایشی-بهداشتی و محصولات دارویی به دلیل مصارف گسترده و متنوع انسانی، بایستی از جنبه­هاي مختلف بیولوژیک مورد ارزیابی قرار گیرند. یکی از عمومی­ترین و متداول­ترین آزمون­هاي ارزیابی بیولوژیک، آزمون­ حساسیت زایی پوستی می­باشد که انجام آن براي اغلب وسایل پزشکی، محصولات دارویی و آرایشی-بهداشتی توصیه شده است. در این آزمون مواد مورد نظر بطور مستقیم یا پس از عصاره­گیری مطابق با استاندارد بین المللی ISO 10993-12 بر روی پوست حیوانات آزمایشگاهی تزریق یا اعمال می­شوند و سپس ایمنی مواد شیمیایی و داروها با بررسی و نظارت واکنش­های پوستی از قبیل؛ التهاب، قرمزی، خارش، خشکی و درجه بندی آن­ها با استفاده از جدول Magnusson – Kligmanمورد ارزیابی قرار می­گیرند. این آزمون، در حال حاضر به سه روش مرسوم و مورد تایید زیر انجام می­شود:

• Guinea Pig Maximization Test: آزمون بیشینه سازی خوکچه هندی (GPMT) بعنوان حساس­ترین، معتبرترین و با دقت­ترین روش آزمون حساسیت­زایی انتخاب شده است که نمونه مورد نظر بر روی خوکچه هندی آلبینو سالم و بالغ بصورت داخل جلدی تزریق می­گردد.
• Close Patch Test (Buehler Test): این روش از آزمون حساسیت­زایی نیز همانند آزمون GPMT بر روی خوکچه هندی آلبینو سالم و بالغ انجام می­گیرد با این تفاوت که این روش حساسیت کمتری داشته و نوع روش اعمال ماده مورد نظر متفاوت می­باشد.
• Local Lymph Node Assay (LLNA): آزمون غدد لنفاوی موضعی از دیگر روش­های آزمون حساسیت­زایی بوده، که بر روی موش آزمایشگاهی انجام می­شود. این روش می­تواند جایگزین دو روش فوق الذکر باشد و روش ارجح برای مواد شیمیایی خالص است.

مراحل انجام آزمون حساسیت زایی پوستی به روش GPMT:

 1- آماده سازی نمونه آزمون و یا عصاره­گیری از نمونه آزمون

  2- آماده سازی و بیهوشی حیوانات مورد آزمون

3- اصلاح کردن ناحیه مورد نظر

4- مشخص نمودن نواحی مورد نظر به منظور تزریق نمونه آزمون

5- تزریق داخل جلدی حجم مشخصی از نمونه آزمون در نواحی مشخص شده

6- نظارت واکنش­های پوستی و درجه بندی براساس جدول Magnusson – Kligman

7- تحلیل نتایج و نتیجه گیری