تست قابلیت رشد
تست قابلیت رشد جهت بررسی قابلیت رشد میکروارگانیسمهای مختلف مانند انواع باکتری و قارچ بر روی محیطهای کشت مورد استفاده در آزمون محیطهای کشت مورد استفاده در آزمون استریلیتی، آزمون بایوبردن و تست میکروبی اتاق تمیز نیاز است که قابلیت رشد تمامی محیطهای کشت مورد استفاده در این روشها بررسی گردد.
کد ATCC | نام سویه |
ATCC 6538 | Staphylococcus aureus |
ATCC 9027 | Pseudomonas aeruginosa |
ATCC 6633 | Bacillus subtilis |
ATCC 10231 | Candida albicans |
ATCC 16404 | Aspergillus brasiliensis |
اگر محیط کشت اختصاصی باشند باید بتوانند مانع از رشد سایر میکروارگانیسم ها بشوند.
به آزمونی که به منظور بررسی قابلیت رشد محیط های کشت مورد استفاده قرار میگیرد، آزمون قابلیت رشد یا growth promotion test یا همان GP test گفته میشود.
در آزمایشگاه نیکوفارمد محیط های کشت خریداری شده با استفاده از سویه های مرجع دارای کد ATCC و همینطور محیط های مرجع مورد تایید سازمان ملی استاندارد، نظر قابلیت رشد مورد بررسی قرار میگیرند.
انجام آزمون قابلیت رشد
آزمون قابلیت رشد به دو صورت کمی و کیفی مطابق استاندارد های USP و ISO در آزمایشگاه نیکوفارمد به انجام میرسد. برای بررسی قابلیت رشد از کمترین مقدار (۱۰۰ cfu) میکروارگانیسم هدف استفاده میشود.
- قابلیت انتخابی بودن (Selectivity) Sf
- بررسی مهار شدن (عدم رشد) میکروارگانیسم غیرهدف
- محیطهای کشت انتخابی علاوه بر قابلیت رشد، باید قادر باشند رشد میکروارگانیسمهای غیرهدف را مهار کنند.
- برای بررسی قابلیت انتخابی بودن از مقادیر زیاد (۱۰۰۰۰ cfu) میکروارگانیسم غیرهدف استفاده میشود.
- قابلیت اختصاصی بودن
بررسی قابلیت افتراق بین کلنیهای میکروارگانیسمهای هدف و غیرهدف و اثبات اینکه میکروارگانیسمهای غیرهدف در شرایط تعیین شده، همان مشخصات ظاهری میکروارگانیسمهای هدف را نشان نمیدهند.
روشهای آزمون عملکرد محیطهای کشت جامد عمومی، انتخابی، اختصاصی روش کیفی
۱ ml | ۱ µl | میکروارگانیسم | روش |
۱۰۴ cfu | ۱۰۲ cfu | هدف | قابلیت رشد |
۱۰۶ -۱۰۵ cfu | ۱۰۴-۱۰۳ cfu | غیرهدف | قابلیت انتخابی بودن |
۱۰۶ cfu | ۱۰۴ cfu | غیرهدف | قابلیت اختصاصی بودن |
سویههای مورد استفاده در آزمون قابلیت رشد (Growth promotion test)
آزمون رشد دهندگی یا قابییت رشد باید در مورد هر بچ از محیطهای کشت مورد استفاده، طبق جدول شماره ۱ انجام شود. برا این منظور ظروف حاوی محیطهای کشت را با سوسپانسیونی حاوی حداکثر ۱۰۰ CFU/ml میکروارگانیسم تلقیح کرده و در شرایط مناسب گرمخانهگذاری کنید.
برای این منظور از سویههای زیر استفاده گردید. سویهها از بانک سلولس انستیتوپاستور ایران، پژوهشگاه ژنتیک، بانک سلولی ایران و پژوهشگاه رویان و مرکز کلکسيون میکروارگانیسم های صنعتی خریداری شدهاند.
جدول ۱٫ سويههاي میکروارگانیسمهاي مناسب براي استفاده درآزمون رشد دهندگی شرکت نیکوفارمد آریا
محل تهیه سویه | گرمخانه گذاری | معیار پذیرش | کد ATCC | کد WDCM | محیط کشت | نام سویه |
انستیتوپاستور ایران | ۴۸ h /35 ۷۲ h /30 | Pr>0.7 کدورت | ATCC 6538 | – | TSA TSB | Staphylococcus aureus |
سازمان ملی استاندارد | ۴۸ h /35 ۷۲ h /30 | Pr>0.7 کدورت | ATCC 25923 | ۰۰۰۳۴ | TSA TSB | Staphylococcus aureus |
سازمان ملی استاندارد | ۴۸ h /35 ۷۲ h /30 | Pr>0.7 کدورت | ATCC 27853 | ۰۰۰۲۵ | TSA TSB | Pseudomonas aeruginosa |
انستیتوپاستور ایران | ۴۸ h /35 ۷۲ h /30 | Pr>0.7 کدورت | ATCC 9027 | – | TSA TSB | Pseudomonas aeruginosa |
سازمان ملی استاندارد | ۴۸ h /35 ۷۲ h /30 ۲۴ h /35 | Pr>0.7 کدورت تشکیل حلقه اندول | ATCC 25922 | ۰۰۰۱۳ | TSA TSB PW | Escherichia coli |
سازمان ملی استاندارد | ۵ days /30 | Pr>0.7 | ATCC 16404 | ۰۰۰۵۳ | SDA | Aspergillus brasiliense |
سازمان ملی استاندارد | ۵ days /30 | Pr>0.7 | ATCC 10231 | ۰۰۰۵۴ | SDA | Candida albicans |
سازمان ملی استاندارد | ۴۸ h /35 ۷۲ h /30 | Pr>0.7 کدورت | ATCC 13124 | ۰۰۰۰۷ | TSA TSB | Bacillus subtilis |
انستیتوپاستور ایران | ۴۸ h /35 ۷۲ h /30 | Pr>0.7 کدورت | ATCC 6633 | – | TSA TSB | Bacillus subtilis |
سازمان ملی استاندارد | ۲۱ h /37 | کدورت | ATCC 13124 | ۰۰۰۰۷ | FTM | Clostridium perfringens |
توضیحات: به منظور مشخص نمودن کد ATCC بر اساس کد WDCM با استفاده از وب سایت زیر عمل میگردد:
Refs.wdcm.org
به این منظور شرکت نیکوفارمد آریا در کنار انجام خدمات آزمون استریلیتی، بایوبردن و میکروبی اتاق تمیز، اقدام به فروش محیطهای کشت با برگه آنالیز قابلیت رشد (growth-promotion) نموده است تا شرکتهای دارویی و تجهیزات پزشکی بتوانند از یک محیط کشت مطمئن جهت انجام تستهای خود استفاده نمایند.
پاسخ دهید
میخواهید به بحث بپیوندید؟مشارکت رایگان.