تست تعیین بار میکروبی

در سال های اخیر، رشته میکروبیولوژی دارویی پیشرفت های تکنولوژیکی متعددی را تجربه کرده است که با انتشار روش های تکمیلی جدید و هماهنگ همراه شده است. بنابراین برای کسانی که مسئول نظارت بر کیفیت میکروبی محصولات دارویی  یا بیودارویی هستند ضروری است که از آخرین تغییرات مطلع باشند. آزمایش‌های محدودیت میکروبی و بار زیستی: رویکردهای اعتبارسنجی و الزامات جهانی، خوانندگان را از طریق روش‌های میکروبیولوژیکی مختلف فهرست‌شده در فهرست با نمودارها و رویکردهای آسان‌تر برای تأیید این روش‌های آزمایشی راهنمایی می‌کند.

 

   برای کسب اطلاعات بیشتر و دریافت خدمات با ما تماس بگیرید.

 

آیا فرآیند تولید شما با کیفیت میکروبی و الزامات استریلیزاسیون مطابقت دارد؟

آزمایش بار زیستی ، یا آزمایش شمارش کل زنده، اندازه‌گیری سطوح آلودگی میکروبی روی یا در یک محصول است.

بار میکروبی را می توان از مواد خام مورد استفاده در فرآیند تولید و یا از طریق نیروی کار یا محیط تولید معرفی کرد. با وجود منابع متعدد آلودگی ، بار میکروبی یک محصول می تواند بین دسته ها نوسان داشته باشد، بنابراین آزمایش منظم و معمول توصیه می شود.

 

چرا باید بار زیستی را ارزیابی کرد و با نتایج چه باید کرد؟

ارزیابی بار زیستی یکی از آزمون های اساسی میکروبیولوژی است. دلیل انجام این تست متفاوت است و به زمینه و کاربرد نهایی محصول تست شده بستگی دارد. تجزیه و تحلیل خوب است، اما چرا؟ با نتایج چه باید کرد؟ و انتظارات مسئولین چیست؟ این مقاله سعی خواهد کرد به این سوالات پاسخ دهد.

 

کاربردهای مختلف ارزیابی بار زیستی

اصطلاح بار زیستی اغلب در زمینه های مختلف و برای کاربردهای مختلف استفاده می شود:

بررسی بار زیستی قبل از استریل کردن یا پر کردن آسپتیک برای یک محصول دارویی استریل

بررسی بار زیستی در حین تولید (در کنترل فرآیند)

بررسی بار زیستی قبل از عقیم‌سازی یا در چارچوب اعتبارسنجی دوره‌ای فرآیند استریل‌سازی برای دستگاه‌های پزشکی

بررسی بار زیستی مواد خام برای مصارف دارویی

عملکرد شمارش باکتری برای محصولات غیر استریل

به نظر من، بهترین تعریف این آزمایش، تعیین کمیت کل فلور میکروبیولوژیکی است که شامل موارد زیر است:

تعداد کل هوازی زنده (TVAC)

تعداد کل بی هوازی زنده (TVanaC)

تعداد کل مخمر و قالب (TYMC)

جستجو برای باکتری های بی هوازی ممکن است مشکوک باشد. در همه موارد، یک تجزیه و تحلیل ریسک باید انجام شود تا فلور مورد تحقیق را تعریف کند.

مقررات مربوط به بار زیستی چندین متون، دستورالعمل ها یا مقررات انتظارات ارزیابی بار زیستی را تنظیم می کنند. همه این مقررات چارچوبی را برای محدود کردن و کنترل حداکثر بار میکروبی قبل از عقیم سازی تعریف می کنند. منابع اصلی آلودگی عبارتند از:

مواد خام

محیط تولید

فرآیند تولید: تأثیر حضور انسان

آب دارویی

 

مقالات بیشتر:

مشاوره جهت ساخت اتاق تمیز

تست خاصیت انتی باکتریال

آزمون انتی باکتریال

آزمون سمیت سلولی

تست تشخیص اختصاصی E. Coli

ارزیابی بار میکروبی

ارزیابی بار میکروبی آزمایشی با سایه های خاکستری برای تجزیه و تحلیل بار زیستی، اصطلاح ارزیابی معنای کامل خود را به خود می گیرد. بسته به کاربردها یا مراحل ساخت، در واقع محدودیت‌هایی وجود دارد، اما بار زیستی صرفاً یک آزمایش کمی نیست. شناسایی بار میکروبی به همان اندازه مهم است که به موارد زیر کمک می کند:

فلور میکروبی را بشناسید

خطر تب زایی را تعریف کنید

خطر مقاومت در برابر استریلیزاسیون را تعریف کنید

 

شناخت فلور میکروبی

شناخت فلور میکروبی ارزیابی بار زیستی امکان شناسایی و کنترل بهتر فلور میکروبی محصول را فراهم می کند. در طول تجزیه و تحلیل بار زیستی اولین دسته های تولیدی، توصیه می شود که همه میکروارگانیسم هایی که شناسایی می شوند شناسایی شوند. شناسایی کامل امکان کنترل و تعریف فلور طبیعی محصول را فراهم می کند. آزمایش های اولیه همچنین اجازه می دهد تا حد هشدار ایجاد شود. ارزیابی مجدد دوره ای ماهیت بار زیستی همچنین امکان بررسی تغییرات در مورد دوم را فراهم می کند و به تعریف میکروارگانیسم های درون زا کمک می کند.

 

تست بار زیستی و روشهای میکروبیولوژی سریع

اطمینان از ایمنی محصول اولویت اصلی صنایع دارویی و تجهیزات پزشکی است. یکی از جنبه های مهم این فرآیند، آزمایش بار زیستی است که شامل ارزیابی آلودگی میکروبی در کل فرآیند تولید، از مواد خام تا بسته بندی نهایی است. در این وبلاگ، به اصول اولیه آزمایش بار زیستی، از جمله مقررات مربوطه، روش‌های رایج و راه‌حل‌های تست قابل اعتماد خواهیم پرداخت.

آزمایش بار زیستی، همچنین به عنوان آزمایش سریع میکروبی شناخته می شود، یک فرآیند کنترل کیفیت حیاتی است. هرچه اندازه‌گیری آلودگی میکروبی در سیستم‌های آب، مواد خام یا محصولات نهایی آسان‌تر و سریع‌تر باشد، توانایی شما برای تصمیم‌گیری سریع‌تر که بر ایمنی و کیفیت تأثیر می‌گذارد، بهتر است. در فرآیندهای تولید و تصفیه تجهیزات دارویی و پزشکی، این امر برای ایمنی بیمار، انطباق با مقررات و کارایی فرآیند بسیار مهم است. اما سال‌هاست که به دلیل پنج روز انتظار برای نتایج بار زیستی با استفاده از روش‌های مبتنی بر رشد، آب‌های دارویی در معرض خطر رهاسازی شده‌اند. زمان آن فرا رسیده است که روش‌های سریع‌تر و قابل اطمینان‌تری برای ارائه اطلاعات مورد نیاز برای به حداقل رساندن خطرات ارائه شوند.

آزمایش بار زیستی به سازندگان دستگاه اجازه می دهد تا بار میکروبی روی محصول خود را تعیین کنند. محصول غیر استریل مشتری با فرآیندی آشنا می‌شود که فرصتی برای بازیابی میکروارگانیسم‌های موجود در محصول یا داخل آن فراهم می‌کند. این فرآیند شامل جداسازی یا تشریح خاص محصول، یک یا چند مرحله شستشو، فیلتراسیون غشایی بالقوه مایع شستشو و انتقال فیلترهای غشایی به محیط رشد میکروارگانیسم‌ها است. پس از انکوباسیون در شرایط انتخابی، میکروارگانیسم‌ها در واحدهای تشکیل کلنی (فیلتر) برای محاسبه بار زیستی شمارش می‌شوند.

 

تست بار زیستی چیست؟

تست بار زیستی فرآیند کنترل کیفیتی است که برای شناسایی و تعیین کمیت میکروارگانیسم‌هایی مانند باکتری‌ها، قارچ‌ها و کپک‌ها استفاده می‌شود. آلودگی میکروبی خطر ایمنی عمده ای را برای محصولات دارویی ایجاد می کند، به ویژه آنهایی که از طریق تزریق یا سایر راه های تهاجمی به بیماران تزریق می شوند. آزمایش بار زیستی نیز یک مرحله لازم قبل از عقیم سازی برای اطمینان از شیوه های موثر عقیم سازی برای دستگاه های پزشکی استریل، مانند استنت ها و پیوندها است.

چندین منبع آلودگی در یک کارخانه تولیدی وجود دارد. یک منبع مواد خام است. مواد فعال، مواد کمکی و سایر اجزای مورد استفاده در فرمولاسیون های دارویی می توانند آلاینده های میکروبی را حمل کنند. منبع بزرگ دیگر سیستم آب تاسیسات است که بیشترین تعداد نمونه آزمایشی را تشکیل می دهد. آزمایش بار زیستی به جلوگیری از خطر عفونت، حفظ ایمنی بیمار و مطابقت با الزامات نظارتی کمک می کند.

 

ملزومات قانونی

نهادهای نظارتی، دستورالعمل هایی را برای آزمایش بار زیستی ایجاد کرده اند. تولیدکنندگان تجهیزات دارویی و پزشکی به دقت از این مقررات پیروی می کنند تا مطابقت را حفظ کنند و نشان دهند که محصولات آنها استانداردهای ایمنی و کیفیت را برآورده می کند.

علاوه بر دستورالعمل های  خاص ، سازمان بین المللی استاندارد (ISO) دستورالعمل های خاص خود را برای آزمایش بار زیستی در صنعت داروسازی دارد.

 

چه چیزی برای آلودگی آزمایش می شود؟

تست محدودیت های میکروبی روی محصولات نهایی غیر استریل و همچنین مواد خام تهیه شده انجام می شود تا بررسی شود که آیا آلاینده های "خطر بالا" وجود دارد یا خیر. هر چیزی که با محصول تماس پیدا می کند نیز آزمایش می شود: بسته بندی (قبل و بعد از استریل کردن)، تمام تجهیزات مورد استفاده (ظروف مخلوط کردن، ماشین های پرکننده، سیستم های فیلتراسیون)، اتاق های تمیز و سیستم های آب.

نظارت بر محیط زیست بخش جدایی ناپذیر دیگری از حفظ یک اتاق تمیز است، اما نمی توان آن را مستقیماً با آزمایش بار زیستی مرتبط کرد. با این حال، می‌توان از آن برای مشخص کردن مکان‌هایی که ممکن است چالش‌هایی در اتاق تمیز و آب تأسیسات ایجاد شود، استفاده کرد. به عنوان مثال، داشتن هوای برگشتی درست در پشت درگاه نقطه استفاده در سیستم آب، خطر آلودگی را افزایش می دهد. برای انجام پایش محیطی، نمونه‌هایی از هوا، سطوح و پرسنل در مناطق تولید جمع‌آوری و آزمایش می‌شوند تا بار میکروبی را ارزیابی کرده و منابع احتمالی آلودگی را شناسایی کنند.

 

روش های تست بار زیستی

یک گردش کار آزمایش میکروبی معمولی دو مرحله دارد: مرحله آماده‌سازی نمونه، و مرحله رشد و شمارش کلنی. بسیار مهم است که فرآیند نمونه برداری و تجهیزات آزمایش خود منبع آلودگی نباشند، که می تواند منجر به نتایج مثبت کاذب شود. آماده سازی نمونه بسته به نوع نمونه متفاوت است و ممکن است شامل یک مرحله فیلتراسیون باشد. در مرحله بعد، نمونه به محیط رشد منتقل می شود، جایی که کلنی ها می توانند در طول دوره جوجه کشی رشد کنند. سپس کلنی ها شمارش شده و به عنوان واحدهای تشکیل دهنده کلنی در واحد حجم گزارش می شوند.

 

دو روش متداول برای آزمایش بار زیستی وجود دارد:

در روش فیلتراسیون غشایی، نمونه ابتدا از طریق یک غشای متخلخل فیلتر می شود تا میکروارگانیسم های بزرگتر از اندازه منافذ را جذب کند. سپس غشا برای رشد به محیط کشت منتقل می شود. این روش برای نمونه های قابل فیلتر مانند آب، مواد خام مایع و محصولات محلول ایده آل است.

روش صفحه مستقیم برای نمونه هایی که نمی توانند فیلتر شوند ایده آل است زیرا مرحله فیلتراسیون ندارد. حجم کمی از نمونه مستقیماً به یک ظرف پتری استریل اضافه می‌شود و روی آن یک محیط آگار مذاب (روش صفحه ریختن) قرار می‌گیرد که به توزیع یکنواخت نمونه با جامد شدن آگار کمک می‌کند. برای آزمایش نمونه‌های با بار زیستی کم، مانند محصولات نهایی، نمونه مستقیماً به محیط کشت جامد (روش صفحه پخش)، بدون فیلتر کردن یا رقیق‌سازی قبلی اضافه می‌شود.

 

تست حد میکروبی چیست؟

تست حد میکروبی "تست برای میکروارگانیسم های مشخص" است که برای تعیین تخمین کمی و کیفی میکروارگانیسم های هوازی زنده در محصولات دارویی با منشاء طبیعی یا بیولوژیکی، مواد خام و محصولات نهایی طراحی شده است. کیفیت میکروبیولوژیکی محصولات غیردارویی یا آرایشی را می توان با استفاده از تخمین تعداد کل زنده و تشخیص وجود گونه های میکروبی خاص در آن مواد کنترل کرد. آزمایش حد میکروبی شامل تعداد کل میکروبی هوازی (TAMC)، تعداد کل مخمرها و کپک‌ها (TYMC) و آزمایش‌های موجودات شاخص است. هدف از آزمایش حد میکروبی بسیار ساده است - حذف هر گونه میکروارگانیسمی که ممکن است متعاقباً منجر به خراب شدن محصول شود یا به بیمار آسیب برساند.

 

چه تفاوت هایی بین تست بار زیستی و حد میکروبی وجود دارد؟

تست محدودیت های میکروبی، بار زیستی برخی از نمونه های تولید دارو را برای اهداف کنترل کیفیت تعیین می کند. بار زیستی به تعداد های میکروارگانیسم ‌های موجود در سطح یا محلولی که هنوز استریل نشده است اشاره می کند. آزمایش بار زیستی برای ارزیابی سطوح آلودگی میکروبی روی یا در یک محصول انجام می شود. تست محدودیت های میکروبی اطلاعات لازم برای انجام شمارش بار زیستی را با تخمین کمی میکروارگانیسم های هوازی زنده در محصولات دارویی، مواد خام و محصولات نهایی فراهم می کند. آزمایش بار زیستی به عنوان شمارش کل زنده نیز نامیده می شود.